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生体分子を集積化した高性能解析系の開発

集成生物分子的高性能分析系统的开发

基本信息

批准号：
15790030
负责人：
加藤大
金额：
$ 2.11万
依托单位：
University of Shizuoka
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

マイクロチップや細管という微小領域の一部に生体由来の機能性物質を固定化し、その機能を利用することで優れた解析用素子を作製した。物質の固定には、高含水ゲルやリン脂質と類似した構造を有する高分子を用いた。このように生体内と類似した環境で生体物質を固定化することで、固定化された生体物資はその機能を持続的に発現した。また微小領域に固定化し、繰り返し利用が可能であることから、固定化に必要な生体物質は、汎用されている手法と比較して数100分の1以下と、極めて微量であった。この固定化法を利用してタンパク質の消化酵素であるペプシンを固定化し、タンパク質試料の消化と分離を細管内で行い、生成したペプチド断片をオンラインで質量分析装置に導入し検出することで、タンパク質の同定が行える解析系を構築した。また薬物代謝酵素を含むラット肝臓ミクロソームを固定化した細管に、薬物と代謝阻害薬を同時に注入することで、薬物の阻害活性を簡便に測定できることを明らかとした。またこれら解析法の開発に並行して、より生体物質の固定化に適した高含水ゲルの開発を行った。従来から使用していたアルコキシシランに加えて、天然由来の高分子であるキトサンやゼラチンを添加した高含水ゲルを調製し、固定化した生体物質の安定性を評価した。その結果、微量のゼラチンを添加することで、固定化した血清アルブミンのアミノ酸に対する親和性が増加すること明らかとなり、今後はゼラチンを添加した高含水ゲルを他の生体物質の固定化に利用していく予定である。

In order to control the micro-field, the origin of the organism, the immobilization of functional materials, and the use of analytical morphemes are used in the system. The material is fixed, the high water content is low, and the fat type is similar to that of the polymer. The quality of the product in vivo is similar to that in the environment, which is similar to that of the immobilization of biological materials and the mechanical properties of the immobilized organisms. The immobilization of small fields, the use of immobilization of small fields, the use of immobilization of necessary biological substances, the use of immobilization techniques, the number of immobilization of less than 100 points, and the use of trace amounts. In the method of immobilization, we used the method of immobilization of digestive enzymes to separate the lines of the tube, to generate the fragments of the digestive enzyme, to analyze the quantitative analysis device, and to analyze the data of the same line. The enzyme is used to immobilize the tube and block the enzyme in the liver. At the same time, the enzyme is injected into the enzyme, and the inhibitory activity of the enzyme is used to determine the enzyme. The analytical method is suitable for the simultaneous operation of raw materials, the immobilization of raw materials, and the operation of high water content compounds. The use of high molecular weight, high water content, high water content, immobilization, and immobilization. The results were as follows: the results were as follows: the results showed that the results showed that the results were as follows: the results showed that the results, the immobilization, the immobilization and the immobilization.