環境因子による生物時計関連転写因子の転写制御メカニズム解析と新規標的遺伝子探索

分析环境因素对生物钟相关转录因子的转录调控机制并寻找新的靶基因

• 批准号: 15790125
• 负责人: 西原 永潤
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790125/
• 关键词: ステロイドホルモン; コアクチベーター; 神経; 生物時計

生物時計関連転写因子と近似した構造を持ち、生物時計の中枢である視床下部視交叉上核における高い発現が認められる、ステロイドレセプターコアクチベーター(SRC-1)に着目し、いくつかの解析を進めてきた。特に発達期の中枢神経系でのSRC-1の役割を明らかにするため、神経幹細胞を用いて、増殖・分化過程でどのようにSRC-1発現が変化しているかを検討した。まず、胎生12.5齢のICRマウス線条体原基から神経幹細胞を採取しbFGF存在下でニューロスフェアー(NS)を形成した。次にNSを用い増殖・分化過程におけるSRC-1の発現様式をRT-PCR、Western blotting法、免疫細胞染色等を用いて検討した。その結果、NSにおけるSRC-1の発現は小脳、精巣と同程度に認められた。そこで、NSにおけるSRC-1発現細胞を検討したところ、Nestin陽性、BrdU取り込み陽性の増殖期神経幹細胞ではSRC-1の発現がほとんど認められないが、少数の未熟な神経分化細胞(Tuj1陽性)では約60%にSRC-1の発現が認められた。次に、1%FBS刺激によってNSの分化誘導を行った。その結果、神経幹細胞の分化に伴いSRC-1の発現は有意に増加し、未熟な、あるいは成熟した神経細胞でそれぞれ47%、72%の割合で共発現していた。一方、アストロサイト、オリゴデンドロサイトでのSRC-1は、それぞれ約5%で共発現が認められるのみであった。これらの検討から、SRC-1が神経幹細胞の分化過程において神経特異的に発現することを明らかにした。神経再生医療において、神経幹細胞分化における細胞系譜の特異的な遺伝子発現制御の解明は非常に重要であり、SRC-1が神経特異的な標的遺伝子の転写調節に関与していることが示唆された。

The biochronometer writing factor is similar to that of the biochronometer center, the upper nucleus of the lower part of the biochronometer center, the upper nucleus of the biochronometer center, and the upper nucleus of the biochronometer center. The biochronometer reading factor is similar to that of the biochronometer center, and the upper nucleus in the lower part of the biochronometer center. It can be detected by the monitoring device, the monitoring device (SRC-1). During the special period, the central government of SRC-1 is responsible for the treatment of cancer, the use of cancer cells, and the process of colony differentiation. The process of colony differentiation results in the development of SRC-1. In the presence of bFGF, the primordial primordium was obtained from the ICR primordium, and the NS was formed in the presence of NS. The secondary NS was used in the process of colonization and differentiation. The SRC-1 was detected by RT-PCR, Western blotting, immunocytochemical staining and so on. The results showed that NS test results showed that the SRC-1 was small and accurate in the same degree. Cell differentiation (Tuj1) was found in a small number of immature cells (Tuj1 sex). The results showed that the cells were infected, Nestin, BrdU, SRC-1, and a small number of immature cells (Tuj1). Second, 1%FBS stimulates the differentiation of NS. According to the results of the experiment, the results showed that the differentiation of cells with SRC-1 was intentionally increased, immature, mature, 47% and 72%, respectively. One party, one party In the process of differentiation, the process of differentiation of SRC-1 cells is very important. It is very important to make and control the understanding of the regenerative medicine, the differentiation of the cell system, and the writing and instigation of the child of SRC-1.