クルーズトリパノソーマと作用する宿主分子のファージディスプレイ法による網羅的検索

利用噬菌体展示法全面寻找与克氏锥虫相互作用的宿主分子

• 批准号: 15790218
• 负责人: 吉田 彩子
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790218/
• 关键词: ファージディスプレイ法; Trypanosoma cruzi; 無鞭毛型原虫; ヒト心筋蛋白質分子; scaffold attachment factor B; sialidase homolog; ribosomal protein L18a; ヒト心筋タンパク質; KIAAO220; ring finger protein 28; translation initiation factor 2

Trypanosoma cruzi感染による慢性症状の1つとして心筋炎が挙げられる。本研究では、T.cruzi原虫-宿主細胞間の相互作用分子を、原虫の心筋細胞寄生モデルを用いて網羅的に検索した。まず、細胞内寄生型であるT.cruzi無鞭毛型原虫の分泌蛋白質(Ama-ES)と反応するヒト心筋細胞cDNAファージライブラリーのスクリーニングを行った結果、ヒト側の候補蛋白質分子の1つとして、scaffold attachment factor B(SAF-B)が得られた。そこで次に、SAF-BのAma-ESと反応した領域(アミノ酸残基1〜107)について大腸菌による組換え体SAF-B(rSAF-B)を作製して、これと反応するT7ファージ無鞭毛型原虫cDNAライブラリーのスクリーニングを行い、SAF-Bと反応する数種類の原虫側候補蛋白質分子を同定した。さらに、それぞれの候補分子のT7ファージコード領域について、ウサギ網状赤血球ライセートを用いたin vitro発現系で組換え体蛋白質を合成し、rSAF-Bとの蛋白質分子同士での反応性を検討したところ、組換え体sialidase homologとribosomal protein L18aについてはrSAF-Bとの結合を示す結果が得られた。SAF-Bにはクロマチンの構造形成・維持やmRNAの転写調節、RNAプロセッシングへの関与といった様々な機能が報告されている。T.cruzi感染時に見られる病態が、本研究においてSAF-Bとの相互作用が明らかとなった原虫分子による宿主SAF-Bの機能修飾の結果であるならば、これらの分子間作用の更なる解析は、病態の発生機構の解明のみならず、これらの分子をターゲットとした治療法の開発につながる可能性が期待できる。以上の結果に関しては、第74回日本寄生虫学会大会で発表の予定である。

Trypanosoma cruzi infection is characterized by chronic symptoms, chronic myositis, and chronic heart disease. In this study, intercellular interaction molecules of protozoa, T.cruzi protozoa and parasitic protozoa of protozoa were studied. The secretory protein (Ama-ES) of T.cruzi without flagellate protozoa was detected by reverse transcription (Ama-ES). The results showed that the protein molecule 1 of phenotypic protein was detected, and scaffold attachment factor B (SAF-B) was detected. In the field of anti-parasitic acid residues (acid residues 110710), the anti-flagellar protozoa of cDNA parasites, such as SAF-B (rSAF-B), T7, cDNA protozoa, parasite, parasite and parasite. The candidate molecules T7 and T7 were used in the field, the reticular red blood cells (RBC) were used to synthesize in vitro proteins, the rSAF-B proteins were used to synthesize proteins, and the ribosomal protein L18a cells were tested by rSAF-B. The results showed that the results were satisfactory. The SAF-B system is designed to maintain the performance of the mRNA system, the RNA system, and the reporting mechanism. When T.cruzi infection occurred, the disease was detected. In this study, we examined the SAF-B interaction between protozoa and host SAF-B. The results showed that the molecular interaction between protozoa and host SAF-B was detected, and the molecular interaction was analyzed. We are looking forward to hearing about the possibility of medical treatment. As a result of the above results, the 74th meeting of the Japanese parasite Society was scheduled for the first time.

项目成果

Intraepithelial infiltration of eosinophils and their contribution to the elimination of adult intestinal nematode, Strongyloides venezuelensis in mice

• DOI: 10.1016/s1383-5769(02)00086-7
• 发表时间: 2003-03-01
• 期刊: PARASITOLOGY INTERNATIONAL
• 影响因子: 1.9
• 作者: El-Malky, M;Maruyama, H;Ohta, N
• 通讯作者: Ohta, N

El-Malky M, Maruyama H, Shimada S, Hirabayashi Y, Yoshida A et al.: "Intraepithelial infiltration of eosinophils and their contribution to the elimination of adult intestinal nematode, Strongyloides venezuelensis in mice."Parasitology International. 52(1)

El-Malky M、Maruyama H、Shimada S、Hirabayashi Y、Yoshida A 等人：“嗜酸性粒细胞的上皮内浸润及其对消除小鼠成虫肠道线虫委内瑞拉类圆线虫的贡献。”国际寄生虫学。

Yabu Y, Yoshida A, Suzuki T, Nihei C, Kawai K, Minagawa N er al.: "The efficacy of ascofuranone in a consecutive treatment on Trypanosoma brucei brucei in mice."Parasitology International. 52(2). 155-164 (2003)

Yabu Y、Yoshida A、Suzuki T、Nihei C、Kawai K、Minakawa N er al.：“壳二呋喃酮连续治疗小鼠布氏锥虫的功效。”寄生虫学国际。

The efficacy of ascofuranone in a consecutive treatment on Trypanosoma brucei brucei in mice

• DOI: 10.1016/s1383-5769(03)00012-6
• 发表时间: 2003-06-01
• 期刊: PARASITOLOGY INTERNATIONAL
• 影响因子: 1.9
• 作者: Yabu, Y;Yoshida, A;Ohta, N
• 通讯作者: Ohta, N

Maruyama H, Aoki M, Okamura S, Yoshida A, Itagaki T, Ohta N: "Adult worms of the rodent intestinal nematode, Strongyloides venezuelensis, successfully invade chick intestinal mucosa."Parasitology International. 52(1). 35-39 (2003)

Maruyama H、Aoki M、Okamura S、Yoshida A、Itagaki T、Ohta N：“啮齿动物肠道线虫，委内瑞拉类圆线虫的成虫，成功侵入雏鸡肠粘膜。”国际寄生虫学。