胆管細胞特異的PDC-E2発現マウスを用いたPBCモデルの作製およびその解析

使用表达胆管细胞特异性 PDC-E2 的小鼠创建和分析 PBC 模型

• 批准号: 15790341
• 负责人: 辻 宏和
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790341/
• 关键词: 原発性胆汁性肝硬変; PDC-E2; トランスジェニックマウス; 異所性発現

我々のグループはヒトPBC肝組織にて、病期の進展に伴い発現遺伝子群が変化していくことを、cDNAマイクロアレイを用いた多数遺伝子発現をもとに解析した。これから、臨床的にPBCが顕性化した病期を解析するだけでは、PBCの病態を理解するためには不十分である事が判明している。本研究においては、自己免疫反応の生じ始めた段階に遡り、更にどのようなカスケードにて免疫現象が進行し、胆管の消失に至るかの解明を試みた。このためにPBCに必須ともいえる<胆管特異的><PDC-E2>という2つの条件をみたしたCK19-PDCE2 Tg miceの作製に成功した。蛋白の発現はmRNA及び蛋白発現にて証明された。また、系統の掛け合わせにより、発現量を更に多いdouble transgenic miceの系を確立した。これらCK19-PDCE2 Tg miceにおける発現形質の解析を行った。自然発症の有無が今回の実験目的の大きな課題の一つであったが、通常のTg mice50匹を生後1年の時点でsacrificeしたが、組織学的に胆管障害は認めなかった。また、肝機能検査にて血清ALT, ALPは正常範囲内であり、PBC診断の血清学的マーカーの一つとされている抗ミトコンドリア抗体も陰性であった。Double Tg miceについては、現在長期観察中だが、生後24週の時点でのsacrificeでは陽性所見は認めなかった。PBCの病因として、PDC-E2の胆管細胞細胞質での異所性発現が原因か結果かについて、以前より議論のあるところであった。本研究で作製したマウスにおいて、PDC-E2異所性発現のみではPBCを惹起し得なかったことは、今後の病態機序解明において有用であった。(2004年アメリカ肝臓病学会にて口演発表)今後何らかのsecond hitが必要なのかについて更に検討を加え、PBCの発症機序を包括的に解析し、それを踏まえて効果的な治療法の開発に繋げることが可能である。

The gene expression of hepatitis C virus was analyzed by PCR and cDNA sequencing. PBC is clinically characterized and its disease duration is analyzed. PBC is pathologically understood. In this study, we tried to explain the immune phenomenon from the beginning to the end of the immune reaction. PBC <PDC-E2>must be produced successfully under the condition of CK19-PDCE2 Tg mice. Protein expression is evidenced by mRNA and protein expression. The system of double transgenic rice is established. The analysis of the appearance quality of CK19-PDCE2 Tg rice was carried out. The existence or absence of natural diseases is one of the major issues of this year's practical purpose. Usually, 50 Tg mice are sacrificed one year after birth, and histological bile duct lesions are not recognized. Serum ALT, ALP in liver function tests were normal, serological diagnosis of PBC was negative. Double Tg mice The cause of PBC, PDC-E2 and the heterosis of cholangiocyte cytoplasm, the cause, the result, the previous discussion In this study, the mechanism of PDC-E2 heterosis was investigated. (2004 In the future, what is the need for a second hit? What is the possibility of a second hit? What is the need for a second hit? What is the possibility of a second hit?