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新しい動脈硬化診断指標:キャピラリーITP法での血中酸化LDL測定確立と臨床意義

动脉硬化新诊断指标：毛细血管ITP法测定血液氧化LDL的建立及临床意义

基本信息

批准号：
15790403
负责人：
瀬川波子
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Fukuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790403/
关键词：
変性LDL Small, dense LDL キャピラリー等速電気泳動 Heparin-Mg^<2+>沈澱法 Large, light LDL Fast-migrating LDL LDL亜分画酸化LDL リポ蛋白分画 Negative charge Native LDL Cu^<2+>による酸化 Apo B除去血漿

项目摘要

平成15年度には、キャピラリー等速電気泳動(cITP)法を用いて荷電によるLDL亜分画の分離、定量と特性を検討した。平成16年度には、cITPによるLDL亜分画[fast-migrating LDL (fLDL)とslow-migrating LDL (sLDL)]と比重によるLDL分画との間の関連を検討した。対象は8名正脂血症(NL)、8名高コレステロール血症(HC)と、9名高トリグリセライド血症(HTG)を有するものとした。早朝空腹時採血を行い、血清を分離した。比重によるLDL亜分画はheparin-Mg^<2+>法にて行った。300U/mlのheparin-Na^+溶液と180mM MgCl_2溶液を1対1の割合で混和し、heparin-Mg^<2+>混合液を作った。血清とheparin-Mg^<2+>溶液(1:1)を混和し、氷上で25分間静置した後、micro centrifugeで4℃、15000rpm、15分間遠心した。Large, light LDL分画(d > 1.044g/ml)が沈澱され、small, dense LDL分画が上清に残るので、比重によるLDL分画が分離される。6μlの血清と12μlのlarge, light LDL分画除去血清を用いてNBD-ceramideで染色した後、cITP分析を行った。cITP fLDL値は内部マーカーに対するピーク下面積として定量した。Large, light LDL分画でのcITP fLDLは血清とsmall, dense LDL分画でのcITP fLDL値より計算した。NL、HC、HTG群いずれにおいても、cITP LDLはsmall, dense LDL分画ではlarge, light LDL分画と比較して高値を示した。これは、cITP LDLが主にsmall, dense LDL分画に分布されることを示した。しかし、HCとHTG群ではsmall, dense LDL分画においてもlarge, light LDL分画においてもcITP LDLがNL群と比較して高値を示した。この結果は、HCとHTGにおいては、small, dense LDL分画だけではなく、large, dense LDL分画でのcITP fLDLの増加も重要である可能性を示唆した。

Pp.47-53 15 year には, キャピラリー uniform electric 気を swimming (cITP) method with いて charged による LDL 亜 painting の separation, quantitative と features を beg し検た. Pp.47-53 16 year には, cITP による LDL 亜 points draw [fast - migrating LDL (fLDL) と missile - migrating LDL (sLDL)] と proportion による LDL points draw との between の masato even を beg し検た. Like は eight is seaborne lipemia (NL), eight high コレステロール disease (HC) と, nine high トリグリセライド disease (HTG) をするものとした. Blood is collected on an empty stomach in the early morning for を to perform を and serum を to separate <s:1> た. Specific gravity によるLDL亜 divide the にて heparin-Mg^<2+> method にて rows った. 300U/ml heparin-Na^+ solution と180mM MgCl_2 solution を 1-on-1 <s:1> cut and で mixed with を and heparin-Mg^<2+> mixture を for った. Serum とheparin-Mg^<2+> solution (1:1)を mixed, 氷 left to stand on 氷で for 25 minutes <s:1> た, then centrifuged in micro centrifugeで at 4 ° c, 15,000 RPM for 15 minutes with telecentric た. Large, light LDL points (d > 1.044 g/ml) が precipitates され, small dense LDL can draw on が tell に residual るので, specific gravity による LDL points draw が separation される. 6μl of <s:1> serum と12μl of <s:1> large, light LDL fractionation to remove serum を staining <s:1> た with <s:1> てNBD-ceramideで and cITP analysis を rows った. The cITP fLDL value is するピ internal たカににに relative to するピとてて quantified たた. Large, light LDL fractions で <s:1> cITP fLDL <s:1> serum とsmall, dense LDL fractions で <s:1> cITP fLDL value よと calculation たた. The NL, HC, and HTG groups ずれにおずれにおてて, cITP LDL <s:1> small, dense LDL sub-map でで large, and light LDL sub-map と comparison of <s:1> て high value を shows たた. <s:1> れが and cITP LDLが are mainly にsmall, and dense LDL submaps に distribution されるとをとをとをとを show た. しかし, HC と HTG group では small, dense LDL points draw においても large, light LDL points draw においても cITP LDL が NL group と compare して high numerical を shown した. この results は, HC と HTG においては, small dense LDL points draw だけではなく, large, dense LDL points draw での cITP fLDL の raised も important requirement by であをる possibility in stopping した.