プロテオミクスによる白血病関連転写因子AML1の機能制御機構の網羅的解析

利用蛋白质组学综合分析白血病相关转录因子AML1的功能调控机制

• 批准号: 15790488
• 负责人: 今井 陽一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790488/
• 关键词: 転写因子; AML1; 蛋白質修飾; リン酸化; mSin3A; アセチル化; P300; プロテオミクス

AML1蛋白質は種々の造血に関わる遺伝子の転写を制御する転写制御因子であり、さらにAML1遺伝子の異常は白血病発症に深く関与することが示唆される。AML1の転写制御因子としての機能発現のためにはPEBP2β/CBFβとヘテロ・ダイマーを形成することが必須であるほか、AML1とp300,Ets-1,C/EBPα,mSin3Aなどの種々の蛋白質との相互作用およびそれによるAML1の機能調節が示されている。そこで、プロテオミクス解析技術を用いてAML1と相互作用を有する蛋白質を網羅的に明らかにし、AML1が生体内で実際にどのような蛋白質と複合体を形成し標的遺伝子の転写を制御しているかを明らかにすることを試みた。平成15年度の研究において、私はAML1がERKによりリン酸化を受けることにより共同抑制因子であるmSin3AがAML1から遊離し、その結果AML1が活性化されることを示した。このAML1とmSin3Aの相互作用はAML1の転写活性化能のみならず、AML1の核内局在や蛋白質の安定性など様々なメカニズムでAML1の機能を調節することを見い出した(Imai Y et al.,Mol. Cell. Biol. 2004)。さらに、共同実験者と.してAML1の転写活性化能がp300によるアセチル化により調節されていることを示した(Yamaguchi Y et al.,J.B.C.2004)。これらの研究によってみいだされたリン酸化型あるいはアセチル化型のAML1の変異体と野生型AML1との間で相互作用を有する蛋白質の相違をプロテオミクス解析技術により明らかにすることにより細胞外からのシグナル伝達などの刺激による、AML1の機能調節のメカニズムが解明されると思われる。

AML1 protein is involved in the regulation of gene expression in hematopoiesis, and is deeply involved in the development of abnormal leukemia in AML1 gene. AML1 gene expression control factor and its functional development are related to the formation of PEBP2 β/CBFβ and the protein interaction between AML1, p300,Ets-1,C/EBPα,mSin3A and the functional regulation of AML1. The application of AML1 interaction analysis technology in protein synthesis and protein complex formation in vivo In the study conducted in 2015, the results of AML1 activation were shown as follows: The interaction between AML1 and mSin3A regulates the function of AML1 by regulating the activity of AML1 and the stability of AML1 in the nuclear domain (Imai Y et al., Mol. Cell. Biol. 2004)。Today is the day of the Lord. The activation of AML-1 was shown to be regulated by p300 (Yamaguchi Y et al., J.B.C.2004)。This study focuses on the interaction between different forms of AML 1 and wild-type AML1, and the protein phase difference between different forms of AML 1 and wild-type AML 1.

项目成果

Chiba S, Takeshita K, Imai Y, Kumano K, Kurokawa M, Masuda S, Shimizu K, Nakamura, Ruddle FH, Hirai H.: "Homeoprotein DLX-1 interacts with Smad4 and blocks a signaling pathway from activin A in hematopoietic cells."Proceedings of the National Academy of S

Chiba S、Takeshita K、Imai Y、Kumano K、Kurokawa M、Masuda S、Shimizu K、Nakamura、Ruddle FH、Hirai H.：“同源蛋白 DLX-1 与 Smad4 相互作用，并阻断造血细胞中激活素 A 的信号通路。

Imai Y, Kurokawa M, Yamaguchi Y, Izutsu K, Nitta E, Mitani K, Satake M, Noda T, Ito Y, Hirai H.: "The Corepressor mSin3A Regulates Phosphorylation-Induced Activation, Intranuclear Location, and Stability of AML1."Molecular and Cellular Biology. 24.3. 1033

Imai Y、Kurokawa M、Yamaguchi Y、Izutsu K、Nitta E、Mitani K、Satake M、Noda T、Ito Y、Hirai H.：“辅阻遏物 mSin3A 调节 AML1 的磷酸化诱导的激活、核内定位和稳定性。”

Yamaguchi Y, Imai Y, Izutsu K, Asai T, Ichikawa M, Yamamoto G, Nitta E, Yamagata T, Sasaki K, Mitani K, Ogawa S, Chiba S, Hirai H, Kurokawa M.: "AML1 is functionally regulated through p300-mediated acetylation on specific lysine residues."Journal of Biolo

Yamaguchi Y、Imai Y、Izutsu K、Asai T、Ichikawa M、Yamamoto G、Nitta E、Yamagata T、Sasaki K、Mitani K、Okawa S、Chiba S、Hirai H、Kurokawa M.：“AML1 通过 p300 进行功能调节