光照射の肥満細胞顆粒放出抑制作用におけるカルシウム動態とフリーラディカル生成

光照射对肥大细胞颗粒释放抑制作用中的钙动力学和自由基产生

• 批准号: 15790595
• 负责人: 森 志朋
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790595/
• 关键词: カルシウム; 肥満細胞; フリーラディカル; 腹腔肥満細胞; アクチンフィラメント; 細胞内骨格; 顆粒放出; 共焦点レーザー顕微鏡; 光照射

【目的】ラット腹腔肥満細胞を用いて、UV照射による顆粒放出動態のメカニズムを解明する。【方法】すでに確立したラット腹腔肥満細胞による細胞内カルシウムイオン濃度([Ca^<2+>]_i)動態と、顆粒放出の同時イメージング法を用いた。採取した肥満細胞標本を、(1)UV非照射群、(2)UVA(長波長紫外線320nm-400nm)照射群、(3)UVB(中波長紫外線290-320nm)照射群の3群に分け、照射群については、エネルギー量(0.3,0.9J)を変え紫外線を照射した。カルシウム感受性色素(FLUO-4)や、フリーラディカル感受性色素(DCF、DAF-2DA)を負荷し、紫外線照射が[Ca^<2+>]_i変動に及ぼす影響や、放出された顆粒を可視化するため、肥満細胞外に放出顆粒染色性色素のSulforhodamine-B (SFRM-B)を添加した。顆粒放出刺激にはcompound48/80を用いた。それぞれの標本での顆粒放出動態および[Ca^<2+>]_i変動を共焦点レーザースキャン顕微鏡LSM5 PASCAL, LSM510-V3.0 (Carl Zeiss社製)を用いて観察した。【結果】(1)UV非照射群では、肥満細胞をCompound48/80で刺激すると[Ca^<2+>]_iの上昇に伴い顆粒放出が生じた。(2)UVA照射群では、[Ca^<2+>]_iの上昇はみられるものの、顆粒放出は抑制傾向にあった。[Ca^<2+>]_iの上昇スピードは0.3J照射群に比べ0.9J照射群で遅延した。ただし、NO上昇、フリーラディカル生成は確認出来なかった。(3)UVB照射群でも、UVA照射群と同様に顆粒放出は抑制傾向にあり、[Ca^<2+>]_iの上昇スピードは0.3J照射群に比べ0.9J照射群で遅延した。NO上昇、フリーラディカル生成は確認出来なかった。【展望】UVA照射やUVB照射などの光線療法は、皮膚科領域では欠かすことの出来ないテーマであり、現在もアトピー皮膚炎や乾癬、脱毛症などの様々な皮膚科疾患で行われている。しかし、そのメカニズムは明確でない。光による生体組織への影響というメカニズムの解明に伴い、今後、更なる有効な治療の開発や、様々な光線療法の改良に繋がることが期待される。

[Objective] To understand the dynamics of particle emission under UV irradiation in abdominal fat cells. [Methods] To establish the intracellular concentration of calcium in abdominal fat cells ([Ca^<2+>]_i), and to use the method of simultaneous release of calcium and calcium. 3 groups of irradiation groups: (1)UV non-irradiation group,(2)UVA(long-wavelength ultraviolet rays 320nm-400nm) irradiation group,(3)UVB(medium-wavelength ultraviolet rays 290-320nm) irradiation group, irradiation group, radiation dose (0.3, 0.9 J), UV irradiation group. The sensitive pigment (FLUO-4), the sensitive pigment (DCF, DAF-2DA), the ultraviolet irradiation, the change of [Ca^<2+>]_i and the influence of the irradiation, the release of particles, the visualization of particles, the addition of the pigment Sulforhodamine-B (SFRM-B). Particle emission stimulation compound48/80 is used. The particle emission dynamics of the sample were observed using a microscope LSM5 PASCAL, LSM510-V3.0 (Carl Zeiss). [Results](1) UV-unirradiated cells were stimulated by Compound48/80,[Ca^<2+>]_i increased, accompanied by particle emission. (2)UVA irradiation group,[Ca^<2+>]_i rise, particle emission and inhibition tendency. [Ca^<2+>]_i rises faster than 0.3J exposure group.ただし、NO上升、フリーラディカル生成は确认出来なかった。(3) Particle emission has the same tendency to be inhibited in the UVB and UVA irradiation groups, and the increase in [Ca^<2+>]_i is longer in the 0.3J irradiation group than in the 0.9J irradiation group. NO rises, and the generation of NO is confirmed. [Outlook] UVA irradiation and UVB irradiation are the main factors affecting dermatological diseases. It is clear that the name of the child is not correct. The influence of light on biological tissue is expected to be improved in the future.

项目成果

森 志朋: "多数の紫斑形成を認めた全身性アミロイドーシスの1例"臨床皮膚科. 57(2). 185-188 (2003)

Shitomo Mori：“伴有多发性紫癜形成的系统性淀粉样变性病例”《临床皮肤病学》57(2) (2003)。