霊長類ES細胞由来神経細胞を利用した脳梗塞の治療

利用灵长类 ES 细胞来源的神经元治疗脑梗塞

• 批准号: 15790766
• 负责人: 高木 康志
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790766/
• 关键词: 胚性幹細胞; 脳虚血; SDIA; 免疫組織; 神経幹細胞; ES細胞; 脳梗塞; 再生医療; 霊長類ES細胞; 脳梗塞モデル

胚性幹細胞(embryonic stem cell, ES cell)から神経幹細胞を誘導することが可能になり、脳血管障害の治療においても胚性幹細胞由来神経細胞の移植が可能となってきた。本年度の研究は、マウス及びサルES細胞由来の神経細胞を脳虚血モデルおよびサルの脳に移植し生着を検討した。マウスES細胞をSDIA法で10日間分化させ、そこからneurosphereを作りマウス虚血脳に移植した。虚血モデルとしてはマウス中大脳動脈30分閉塞モデルを用いた。再潅流後24時間で外側線状体に細胞を移植し、14日後、28日後にその生着と分化を免疫組織学に検討した。移植後14日で移植細胞が占めた領域は18.8±2.5%/hemisphereであったのに対し移植後28日後には26.5±4.0%/hemisphereであった。更に移植後28日後の分化について検討した。様々なマーカーの移植したGFP陽性細胞の中での割合はNeuN 60.0±10.0%,TuJ1 40.0±10.0%,GFAP 22.0±7.2%,GalC 0.38±5.3%であった。更にThyrosine hydsrohylase 0.6±0.36%,GAD 33.3±11.5%,glutamate 13.3±5.8%,serotonin 0.5±0.44%,ChAT 0.4±0.2%であった。以上より、マウスES細胞由来神経幹細胞は虚血脳内で生着し、分化することが示された。また、カニクイサルES細胞由来神経幹細胞においても同様の実験を行った。カニクイサルES細胞をSDIA法で2週間分化させ、更にneurosphereとして培養し、カニクイサル脳に移植した。移植した細胞は移植後14週後の免疫組織学検討でTuJ1を発現しており、サルES細胞由来神経幹細胞もサル脳内で生着することが示された。

Embryonic stem cells (ES cells) can be induced from neural stem cells, and can be transplanted from embryonic stem cells to treat vascular disorders. This year's study examined the development of neurocytes from which ES cells originated. ES cells were differentiated by SDIA method, and the neurosphere was transplanted. The blood is in the blood. The blood is in the blood. At 24 days after reperfusion, the cells were transplanted, and at 14 and 28 days after reperfusion, the differentiation was studied by immunohistochemistry. 14 days after transplantation, transplanted cells accounted for 18.8±2.5%/hemisphere and 26.5±4.0%/hemisphere after transplantation. After 28 days of transplantation, the differentiation was investigated. NeuN 60.0±10.0%,TuJ1 40.0± 10.0%,GFAP 22.0±7.2%,GalC 0.38±5.3% were found in the middle of GFP positive cells. Thyrosine hydrolase 0.6±0.36%,GAD 33.3±11.5%,glutamate 13.3±5.8%,serotonin 0.5±0.44%,ChAT 0.4±0.2%. The above ES cells are derived from neural stem cells, and they are differentiated from each other. ES cells are derived from neural stem cells. ES cells were differentiated by SDIA in 2 weeks, cultured in neurosphere, and transplanted. Immunohistological examination of transplanted cells showed that TuJ1 was detected 14 weeks after transplantation, and ES cells were derived from neural stem cells.

项目成果

Dopaminergic neurons generated from monkey embryonic stem cells function in a Parkinson primate model.

• DOI: 10.1172/jci21137
• 发表时间: 2005-01
• 期刊: The Journal of clinical investigation
• 作者: Y. Takagi;J. Takahashi;H. Saiki;A. Morizane;Takuya Hayashi;Y. Kishi;Hitoshi Fukuda;Yo Okamoto;M. Koyanagi;M. Ideguchi;H. Hayashi;Takayuki Imazato;H. Kawasaki;H. Suemori;S. Omachi;H. Iida;N. Itoh;N. Nakatsuji;Y. Sasai;N. Hashimoto