ぶどう膜炎におけるケモカインレセプターCCR5の関与とその阻害薬による治療効果

趋化因子受体CCR5在葡萄膜炎中的作用及其抑制剂的治疗作用

• 批准号: 15791007
• 负责人: 鈴木 潤
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791007/
• 关键词: ぶどう膜炎; ケモカイン; EAU; CCR5

CCR5をノックアウトしたマウスに対し実験的自己免疫ぶどう膜網膜炎(EAU)を惹起し、その発症が野生型マウスに比べ抑制されるか検討した。『実験』牛網膜抽出抗原(IRBP)の合性ペプチド200μgを完全フロインドアジュバントとともにC57BL/6マウス、C57BL/6CCR5ノックアウトマウスに免疫,同時に百日咳菌毒素1μgを強化免疫しEAUを作製した.免疫後21日目に眼底を観察することでEAUの重症度を臨床的に評価し、マウス屠殺後眼球を摘出し病理組織学的にも評価を行った。摘出眼球については免疫染色を行い、眼局所への浸潤細胞の性状について検討した。また脾臓、眼周囲リンパ節よりリンパ球を回収し、抗原刺激に対する増殖反応、培養上清のサイトカインについて調べた。『結果』EAUの重症度は臨床スコアーで野生型2.1±0.4、CCR5ノックアウトマウス2.5±0,4、病理スコアーで野生型1.5±1.4、CCR5ノックアウトマウス1.8±1.1で、CCR5ノックアウトマウスでも野生型マウスと同等のEAUが発症した。免疫染色を行い眼局所への浸潤細胞について検討したところ、CCR5ノックアウトマウスでは野生型に比べT細胞の浸潤が少なく、代わりに顆粒球の浸潤がみられた。CCR5ノックアウトマウスでは摘出リンパ球の抗原刺激に対する反応は保たれていたが、眼周囲リンパ節のリンパ球のIFN-γ産生は低く、また脾細胞ではIL-6、MCP-1の産生が野生型に比べ高くなっていた。CCR5を阻害することでぶどう膜炎の発症を抑制できるかEAUを用いて検討したが、抑制をすることはできなかった。しかしCCR5を阻害するとEAUの病態は変化し、リンパ球の浸潤は抑制され代わりに頼粒球の浸潤が認められた。これには脾臓におけるIL-6、MCP-1の産生増加が関与していると考えられた。

敲出CCR5的小鼠引起了实验性自身免疫性乌维因性视网膜炎（EAU），我们研究了与野生型小鼠相比，该疾病的发作是否抑制。牛视网膜萃取抗原（IRBP）的“实验”200μg用C57BL/6小鼠和C57BL/6CCR5基因敲除小鼠与完全弗雷德的佐剂一起免疫，并在1μg的百日咳B. delptussis毒素中免疫。通过在免疫后的第21天观察眼底，对EAU的严重程度进行了临床评估，并在组织病理学上还评估了小鼠牺牲后去除眼球。对切​​除的眼球进行了免疫染色，并检查了浸润细胞的特性。还从脾脏和眼周淋巴结中收集淋巴细胞，并检查了对抗原刺激的增生反应和培养上清液中细胞因子的增生反应。结果：在临床评分中，EAU的严重程度为2.1±0.4个野生型小鼠，2.5±0,4 CCR5敲除小鼠，病理评分中的1.5±1.4野生型小鼠和1.8±1.1 CCR5敲除小鼠也发展为EAU EAU等于野生型小鼠。当进行免疫染色以检查浸润局部眼位点的细胞时，CCR5基因敲除小鼠的T细胞浸润少于野生型，而是显示粒细胞浸润。尽管在CCR5基因敲除小鼠中维持对切除的淋巴细胞抗原刺激的反应，但眼周淋巴结淋巴结淋巴细胞的IFN-γ产生较低，脾细胞产生的IL-6和MCP-1的脾细胞比野生型高。我们研究了使用EAU来确定抑制CCR5是否可以抑制葡萄膜炎的发作，但不可能抑制它。然而，CCR5的抑制作用改变了EAU的病理，抑制淋巴细胞浸润，而是观察到粒细胞的浸润。人们认为这参与了脾脏中IL-6和MCP-1的产生。