各種口腔内腫瘍に対する光線力学的療法の有用性とそのメカニズムに関する検討

光动力治疗多种口腔内肿瘤的有效性及机制研究

• 批准号: 15791084
• 负责人: 伊達 昌孝
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791084/
• 关键词: 光線力学的療法; 口腔内腫瘍; apoptosis; PAD-S31; レーザー; caspase

(目的)PAD-S31は670nmに吸収波長帯を持つ新しいphotosensitizerである。我々は口腔内腫瘍に対するPAD-S31を用いたPDTの効果をin vitroおよびin vivoで検討し、さらにapoptosisを誘導するかどうかを検討した。(方法)PAD-S31とともに2時間培養した各種ヒト口腔内腫瘍細胞株(SAS,HSC-4)、浜松ホトニクス社の半導体レーザーPDT HLD-1を使用し、670nmのレーザー光線の照射を行い、WST-8assayにて細胞障害性を検討した。また、apoptosisを誘導しているかどうかを検討するためにTUNEL染色およびヒストン結合性DNA fragmentのELISA assayを行った。さらにシステインプロテアーゼの一種であるcaspaseの各種基質とtetrapeptide caspase inhibitorを用いてapoptosisのsignal pathwayの検討を行った。次にヌードマウスの皮下に各種ヒト口腔内腫瘍細胞株を植え腫瘍塊を作成し、8mg/kg PAD-S31を尾静脈投与2時間後にレーザーを照射し、腫瘍塊に対する効果を検討した。また、照射後の組織標本をTUNEL染色しapoptosisが誘導されているかどうかを確認した。(結果)PAD-S31を用いたPDTは、各種ヒト口腔内腫瘍細胞株に濃度、照射量、時間依存性に強い細胞障害効果を示し、優位にTUNEL染色陽性細胞が確認され、ヒストン結合性DNA fragmentの増加が認められた。また、HSC-4においてcaspase6,8,9の活性化は見られなかったが、caspase3の活性が上昇しcaspase inhibitorによってヒストン結合性DNA fragmentと細胞障害性の低下を認めた。さらに、腫瘍塊に対しても強い抗腫瘍効果を示し、TUNEL染色陽性細胞の有意な増加を認めた。(結論)PAD-S31を用いたPDTは、in vitroおよびin vivoにおいて口腔内腫瘍細胞に対し強い抗腫瘍効果があり、またcaspaseを介したapoptosisを誘導した。

(objective) PAD-S31 670nm absorbs long-term absorption waves and maintains a new wave length of photosensitizer absorption. We will use the PDT to in vitro the in vivo and apoptosis the PAD-S31 in the mouth. (methods) all kinds of cell lines in oral cavity (SAS,HSC-4), half-body cell lines of PDT HLD-1, 670nm radiation line and WST-8assay cell line of Hamamatsu were cultured for 2 hours. The combination of TUNEL staining and DNA fragment ELISA assay will be affected by the combination of DNA fragment and ELISA assay, which can be used in this paper. All kinds of basic tetrapeptide caspase inhibitor of caspase should be used as soon as possible. Apoptosis signal pathway should be used to improve the quality of the bank. After subcutaneous injection, all kinds of cell lines in the oral cavity were implanted, and 8mg/kg PAD-S31 was injected intravenously at 2 hours later. After irradiation, the tissue marker was stained with TUNEL. Apoptosis staining was used to determine the presence of DNA. (results) PAD-S31 assay was used to detect cell strain severity, exposure dose, time-dependent and time-dependent cytotoxicity of cell lines in the oral cavity of all kinds of oysters. TUNEL staining was used to confirm the cell strain, and the combination of DNA fragment and DNA was added to the assay. The combination of HSC-4, HSC-4, caspase6,8,9, activation, caspase inhibitor, caspase inhibitor, and caspase inhibitor activity showed that the cytopathic harmfulness was low. The results of TUNEL staining and TUNEL staining showed that the sexual cells were intentionally increased. (results) PAD-S31 was used to induce PDT, in vitro, in vivo, and caspase in the oral cavity to strengthen the anti-tumor effect.

项目成果

Fukuchi K, Date M, Azuma Y, et al.: "Apoptosis in human oral squamous cell carcinomas is induced by 15 -deoxy-Δ12、14-prostaglandin J2 but not by troglitazone."J Dent Res. 82(10). 802-806 (2003)

Fukuchi K、Date M、Azuma Y 等人：“人类口腔鳞状细胞癌中的细胞凋亡是由 15-脱氧-Δ12、14-前列腺素 J2 诱导的，但不是由曲格列酮诱导的。”J Dent Res 82(10)。 -806 (2003)

Date M, Fukuchi K, Morita S, et al.: "15-deoxy-. ^<12,14>-prostaglandin J_2, a ligand for peroxisome proliferators -activated receptor-., induces apoptosis in human hepatoma cells."Liver Int. (In press).

Date M、Fukuchi K、Morita S 等人：“15-脱氧-。^<12,14>-前列腺素 J_2，过氧化物酶体增殖物激活受体-的配体。诱导人肝癌细胞凋亡。”Liver Int

Date M, Fukuchi K, Namiki Y, et al.: "Therapeutic Effect of Photodynamic Therapy Using PAD -S31 and Diode Laser on Human Liver Cancer Cells."Liver Int. (In press).

Date M、Fukuchi K、Namiki Y 等人：“使用 PAD -S31 和二极管激光的光动力疗法对人类肝癌细胞的治疗效果。”Liver Int。