カンキツ及び近縁属のかいよう病抵抗性の遺伝様式とその分子マーカーの解析

柑橘及相关属抗溃疡病遗传模式及其分子标记分析

• 批准号: 04F04193
• 负责人: 松本 亮司
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Saga University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04193/
• 关键词: カンキツ; かいよう病抵抗性; 遺伝・育種; 分子マーカー; 遺伝

カンキツ属の重要病害にかいよう病がある。米国フロリダでは本菌の侵入を許し、甚大な被害が罹病性のグレープフツーツにでている。温暖多湿な我が国では本菌は蔓延しやすい。幸い、我が国の主要カンキツが抵抗性のウンシュウミカンであったため、それほど問題とならなかった。我が国におけるカンキツ新品種の作出にはカンキツかいよう病抵抗性の付与は必須である。これまで本病の抵抗性の評価は、バクテリアである本病菌を培養し、交雑実生の幼葉に針接種を行い同心円状の病斑の大きさから抵抗性の程度を評価してきた。この幼苗検定より簡便で、迅速、しかも確実な検定法の開発のため、抵抗性の分子マーカーの探索を行った。カンキツ属内の種間交雑を行い、9組み合わせ、約1,000個体を獲得し、10葉期の幼葉に接種し、2ヶ月後の病斑直径を計測し、抵抗性個体と罹病性個体の分離比から遺伝様式を検討した。抵抗性の遺伝様式は1遺伝子以上の複数の遺伝子により制御された量的形質遺伝子座(QTL)と考えられた。このうち、ハッサク×クレメンテインの組み合わせの集団を選び、RAPD(Dominant)とSSR(Codominant)の二つのPCRに基づくDNAマーカーを検討した。RAPD分析では75プライマー(Operon primers A,B,E,G)のうち4プライマー(A4,A19,B12,E9)で多型が検出された。SSR分析では26プライマーペアー(Citrus Micro Satellite(CMS)2〜48)のうち5プライマーペアー(CMS4,7,14,23,24)において多型が検出された。その結果、1遺伝子座に2対立遺伝子を持つCMS4の1遺伝子がかいよう病罹病性と高度に連鎖していた。またSSRマーカーは共優性マーカーであり、ホモとヘテロを分けることができ、罹病性個体では、CMS4の対立遺伝子がホモであることも判明した。連鎖地図は現在構築中であり、しばらく時間を要する。以上、本研究によりカンキツかいよう病抵抗性と連鎖するDNAマーカーが初めて見つけられた。

The disease is an important disease. The invasion of the bacteria in the United States is allowed, and it is very difficult to kill the disease. Warm and humid, our country is full of bacteria. Fortunately, our country's main problems are resistant to them. We have a new variety of disease resistance and must pay. The resistance of this disease was evaluated by culture and inoculation of young leaves of this pathogen. This method of seedling identification is simple, rapid, accurate, and resistant to molecular development. Interspecific interactions within the genus were observed, 9 groups were identified, approximately 1,000 individuals were harvested, young leaves were inoculated at 10 leaf stages, lesion diameters were measured 2 months later, and segregation ratios between resistant and diseased individuals were discussed. A resistance gene is a complex gene with more than one gene. The DNA sequence of DNA was analyzed by RAPD(Dominant) and SSR(Codominant). RAPD analysis (Operon primers A,B,E,G)(A4,A19,B12,E9) SSR analysis is carried out on 26 samples (Citrus Micro Satellite(CMS)2 ~ 48) and 5 samples (CMS4,7,14,23,24). The result is that 1 gene is linked to 2 genes, and 4 genes are linked to 2 genes. SSR co-optimality is determined by the number of individuals infected and the number of individuals infected. The chain is now constructed in the middle, and the time is required. In this study, the disease resistance was linked to DNA.