BUBR1による中心体複製制御の分子機構の解析

BUBR1控制中心体复制的分子机制分析

• 批准号: 04J04744
• 负责人: 及川 達夫
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kyushu University (2006)Yamaguchi University (2004-2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J04744/
• 关键词: BubR1; 中心体; 癌; 有糸分裂期チェックポイント; Centrosome; p53; Genomic Convergence; Mitotic Checkpoint; centrosome; Genomic convergence; mitotic checkpoint; transcription; MPM2; CDK1; cyclin B

中心体は正確な細胞分裂、染色体分配に重要な細胞内小器官である。中心体過剰複製は有糸分裂期に染色体分配の不均衡を生じさせ、細胞の癌化を引き起こす要因の1つと考えられている。我々はこれまでに有糸分裂期チェックポイントタンパク質であるBubR1がp53ノックアウトマウス細胞株において中心体過剰複製を抑制することを明らかとした。このことからBubR1は腫瘍抑制効果を有し、新たな癌分子標的治療ターゲットになりうることが期待された。本研究ではヒト膀胱癌細胞株におけるBubR1の腫瘍抑制効果を検討した。1,BubR1の腫瘍抑制効果の検討BubR1発現ベクターを7種類のヒト膀胱癌細胞株に遺伝子導入した後、抗γ-tubulin抗体を用いた免疫染色、ならびにColony Formation Assayを行うことで中心体数の計測と腫瘍抑制効果を検討した。BubR1の遺伝子導入によりすべてのヒト膀胱癌細胞株で中心体過剰複製の抑制、コロニー形成数の減少が認められた。2,BubR1による腫瘍抑制機構の解析BubR1発現ベクターと共に遺伝子導入マーカーとしてGFP発現ベクターをヒト膀胱癌細胞株に遺伝子導入した後、継時的にGFP陽性細胞率の計測、またTUNEL法を用いてアポトーシス率を検討ならびに有糸分裂期細胞数の計測を行った。BubR1を遺伝子導入したヒト膀胱癌細胞株において時間の経過とともにGFP陽性細胞率の減少、また有糸分裂期細胞数ならびにアポトーシス細胞数の増加が認められ、BubR1による腫瘍抑制機構は、ヒト膀胱癌細胞を有糸分裂期で細胞周期を停止させアポトーシスの活性化であることが示唆された。以上の結果によりBubR1は新たなヒト膀胱癌の分子標的治療ターゲットになりうる可能性が示唆された。

The centrosome is correct in terms of cell division, chromosome distribution and small intracellular organs. The central body has a series of chromosomal distribution during the mitotic phase, the distribution of chromosomes is not balanced, and the carcinogenesis of the cell is due to the fact that it is due to the first cycle. During the period of division, we do not know that there is a system of cleavage. We do not know if we are in the process of division. We do not know if we are in the process of division. We do not know if we are in the process of division. We do not know that BubR1 p53 is involved in the cell cycle. The treatment of cancer molecules in the presence of BubR1 is expected to be effective. In this study, bladder cancer cell line was isolated from bladder cancer cell line. The results showed that the tumor suppressed the bladder cancer cell line BubR1. 1BubR1 immunoreactivity inhibition assay showed that the anti-γ-tubulin antibody was immuno-stained with anti-γ-tubulin antibody, and the number of centrosome cells was significantly decreased after the introduction of anti-γ-BubR1 antibody. The central body of the bladder cancer cell line was suppressed and the number of BubR1 cells formed was less than that of bladder cancer cells. (2) the cell rate of GFP was calculated after the introduction of the cell line of bladder cancer cell line after the introduction of BubR1 and TUNEL, and the cell rate of mitotic phase of bladder cancer cell line was measured by TUNEL method. When BubR1 was transferred into human bladder cancer cell line, the rate of sexual cell was very low, the number of cells in mitotic phase was low, the number of cells in mitotic phase was increased, the inhibition mechanism of BubR1 was established, and the cell cycle in mitotic phase of bladder cancer cell was not activated. The above results show that the possibility of the new treatment of bladder cancer molecules in BubR1 is significant.

项目成果

Cloning of the feline GADD45 cDNA and analysis of its mutation in feline lymphoma cell lines.

• DOI: 10.1292/jvms.68.297
• 发表时间: 2006-03
• 期刊: The Journal of veterinary medical science
• 作者: T. Oikawa;M. Okuda;N. Kaneko;Malaika Watanabe;H. Hiraoka;K. Itamoto;M. Nakaichi;T. Mizuno;H. Inokuma

Transcriptional control of BubR1 by p53 and suppression of centrosome amplification by BubR1

• DOI: 10.1128/mcb.25.10.4046-4061.2005
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Oikawa, T;Okuda, M;Fukasawa, K
• 通讯作者: Fukasawa, K

Enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of canine Leptospira antibodies using recombinant OmpL1 protein

使用重组 OmpL1 蛋白检测犬钩端螺旋体抗体的酶联免疫吸附试验

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Veterinary Medical Science 67(3)
• 作者: Iida;S.;Asakura;N.;Tabata;K.;Okura;I.;Kamachi;T.;津曲 真一;鈴木久美;鈴木久美;鈴木久美;鈴木 久美;鈴木 久美;鈴木久美;鈴木久美;Hayashi T;Malaika Watanabe;Tatsuo Oikawa;Naoki Kaneko;Masaru Okuda
• 通讯作者: Masaru Okuda

中心体とサイクリン

中心体和细胞周期蛋白

• 发表时间: 2004
• 期刊: 生体の科学
• 作者: Iida;S.;Asakura;N.;Tabata;K.;Okura;I.;Kamachi;T.;津曲 真一;鈴木久美;鈴木久美;鈴木久美;鈴木 久美;鈴木 久美;鈴木久美;鈴木久美;Hayashi T;Malaika Watanabe;Tatsuo Oikawa;Naoki Kaneko;Masaru Okuda;及川達夫
• 通讯作者: 及川達夫

Detection of centrosome amplification as a surrogate marker of dysfunction in the p53 pathway -p53 gene mutation or MDM2 overexpression.

检测中心体扩增作为 p53 通路功能障碍的替代标记 -p53 基因突变或 MDM2 过度表达。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Vet.Comp.Oncol. 3
• 作者: Kaneko;N. et al.
• 通讯作者: N. et al.