コンディショナルシステムを用いた上皮の分化・極性形成機構の解明

使用条件系统阐明上皮分化和极性形成的机制

• 批准号: 04J04784
• 负责人: 酒井 直行
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J04784/
• 关键词: 核内受容体; 上皮分化; 細胞接着装置; タイト結合; 細胞極性; 前立腺; 細胞内接着装置; 細胞増殖

1.マウス正常前立腺におけるタイト結合タンパク質claudinの発現:核内受容体が特定の臓器の上皮分化・極性形成を制御するかを明らかにするため、正常臓器におけるタイト結合タンパク質の発現を調べた。マウス正常前立腺におけるタイト結合タンパク質claudinの発現を解析し、claudin-1,-3,-4,-5,-7,-8,-10が遺伝子・タンパク質レベルで発現していることを明らかにした。また免疫染色によってclaudinsの細胞内局在を解析し、claudin-3,-4,-5,-8が前立腺の分泌細胞のapical側のみ、claudin-7,-10がapicalとbasolateral側の両方、claudin-1がbasal側のみに発現していることを示した。2.NHF4α発現誘導株を用いた微絨毛形成機構の検討:微絨毛は細胞表面にみられる超微構造で、物質吸収や情報伝達に重要な役割を果たす。我々はHNF4αの発現を誘導できるマウスF9細胞株とラット血管内皮細胞株を用いて、HNF4αが微絨毛の形成を著しく誘導することを見出した。微絨毛関連分子の発現を解析したところ、HNF4αがEBP50 (Ezrin/Radixin/Moesin-binding phosphoprotein 50)の発現を亢進させることが明らかになった。RNAi法を用いてEBP50の発現を特異的に抑制したところ、微絨毛形成が顕著に阻害された。野生型F9細胞においてEBP50を過剰発現させたところ、微絨毛形成は弱く、更に微絨毛形成能を持つレチノイン酸で処置すると非常に発達した微絨毛が認められた。これらの知見は、HNF4αが微絨毛形成の強力なモルフォゲンとして働くこと、この過程にはEBP50に加えて、HNF4αとレチノイド受容体のいずれによっても誘導される分子が必要であることを示している。

1. Normal prostatitis glands combine with claudin in the epithelium of specific nuclear receptors. Differentiation and polarity formation are controlled by the するかを明らかにするため, and the normal 铓器 におけるタイト combines the タンパク性の発成をadjusted べた. Normal prostatic gland におけるタイト Combined with タンパクquality claudinの発开をanalytic し, claudin-1, -3,-4,-5,-7,-8,-10が缝子・タンパク之qualityレベルで発成していることを明らかにした.またimmunostaining によってclaudins のcellular localization を し, claudin-3, -4, -5, -8 が prostatinal secretory cells のapical side のみ, c laudin-7,-10 is the basal side of the basal side, and claudin-1 is the basal side of the basal side. 2. The NHF4α induced strain uses the microvilli-forming mechanism: microvilli are the cell surface's ultrafine structure and material absorption information, which is important for cutting the fruit. We have developed HNF4α-induced vascular endothelial cells from the F9 cell line of HNF4α. The cell lines were induced with HNF4α microvilli formation and HNF4α microvilli formation. Analysis of microvilli-associated molecules, HNF4α and EBP50 (Ezrin/Radixin/Moesin-binding phosphoprotein 50) の発appears to be hyperactive and させることが明らかになった. The RNAi method uses EBP50 to specifically inhibit and inhibit microvilli formation. Wild-type F9 cells have low EBP50 resistance and are more susceptible to microvilli formation. The formation of microvilli is very effective in maintaining the ability of microvilli to be treated with acid.これらの知は、HNF4αがMicrovilli formation のstrongなモルフォゲンとして卍くこと、このprocess にはEBP50にAdd えて, HNF4α とレチノイド acceptor のいずれによっても induce molecule が であることをshow している.

项目成果

The nuclear receptor hepatocyte nuclear factor 4α acts as a morphogen to induce the formation of microvilli

• DOI: 10.1083/jcb.200608012
• 发表时间: 2006-12-18
• 期刊: JOURNAL OF CELL BIOLOGY
• 影响因子: 7.8
• 作者: Chiba, Hideki;Sakai, Naoyuki;Sawada, Norimasa
• 通讯作者: Sawada, Norimasa

Activation of p21^<CIP/WAF1> gene expression and inhibition of cell proliferation by overexpression of hepatocyte nuclear factor-4alpha.

通过肝细胞核因子 4α 的过度表达激活 p21^<CIP/WAF1> 基因表达并抑制细胞增殖。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Experimental Cell Researh 302(1)
• 作者: 縫部義憲;松崎寛;佐藤礼子;佐藤礼子;佐藤礼子;今井 航;今井 航;石川 亮;横井 修司;石田雅春;石田雅春;石田 雅春;石田 雅春;K.Shigetoh;T.Sasakawa;T.Sasakawa;K.Shimada;K.Umeo;D.Huo;D.Huo;S.Yoshii;M.Matsumura;T.Sasakawa;Sakai N et al.;Chiba H et al.;Chiba H et al.
• 通讯作者: Chiba H et al.

Expression patterns of claudin family of tight-junction proteins in the mouse prostate

紧密连接蛋白claudin家族在小鼠前列腺中的表达模式

• 发表时间: 2007
• 期刊: Histochem Cell Biol 127
• 作者: Sakai N;Chiba H;Fujita H;Akashi Y;Osanai M;Kojima T;Sawada N
• 通讯作者: Sawada N