植物の澱粉生合成および貯蔵タンパク質集積における制御機構の解明

阐明植物淀粉生物合成和储存蛋白积累的调节机制

基本信息

批准号：
04J08923
负责人：
濱田茂樹
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は,澱粉・貯蔵タンパク質生合成における制御機構を,タンパク質翻訳後修飾および細胞内mRNA輸送レベルで解明することを目的とした.1.澱粉生合成においては,昨年度の研究からインゲンマメstarch branching enzyme 2(PvSBE2)をプロセシングする酵素として,セリンプロテアーゼの一種であるsubtilase(PvSLP1)を同定した.今年度は本プロテアーゼcDNAのクローニングを行った.登熟種子から調製したcDNAライブラリーをスクリーニングし,PvSLP1をコードするcDNAを単離した.塩基配列の解析から,本cDNAは2414bpからなり,769アミノ酸残基のORFを含むことが明らかとなった.また予想されるアミノ酸配列は,ダイズ由来subtilaseと高い相同性を示した.精製酵素のN末端配列およびPvSLP1の推定アミノ酸配列から,2つの異なる翻訳開始点が予想された.現在,形質転換体タバコを用いた細胞内局在性の解析を試みている.2.貯蔵タンパク質生合成においては,イネプロラミンmRNA輸送に関与すると考えられる,細胞骨格結合120kDaタンパク質(Rp120)と複合体分子を形成するタンパク質の同定を目的とした.昨年度の研究からtwo hybrid systemを用いたスクリーニングにより,glycine rich RNA binding protein, unknown proteinを候補タンパク質として見出した.今年度は,これら候補タンパク質をコードする遺伝子の単離および大腸菌発現系を構築し,得られた発現酵素を用いて抗体を作成した.今後は免疫沈降法等によってin vitroにおける結合活性を検討する予定である.

这项研究旨在阐明在翻译后修饰和细胞内mRNA转运水平下淀粉和储存蛋白质生物合成的调节机制。1。在淀粉生物合成中，我们发现去年对淀粉分支酶枯酶（PVSLP1）的研究（一种丝氨酸蛋白酶）被确定为处理2（PVSBE2）的酶。今年，蛋白酶cDNA被克隆。筛选从成熟种子制备的cDNA文库，并分离编码PVSLP1的cDNA。对碱基序列的分析表明，该cDNA由2414 bp组成，并包含769个氨基酸残基的ORF。预期的氨基酸序列显示出与大豆衍生的毕利酶的高同源性。通过纯化酶的N末端序列和推导的PVSLP1的氨基酸序列预测了两个不同的翻译起始点。目前，我们正在尝试使用转化剂烟草分析亚细胞定位。 2。在储存的蛋白质的生物合成中，目的是鉴定出与细胞骨架结合的120KDA蛋白（RP120）形成复杂分子的蛋白质，这些蛋白被认为参与了水稻mramine mRNA转运。去年研究的两个通过使用杂化系统筛选，我们发现了富含甘氨酸的RNA结合蛋白和未知蛋白作为候选蛋白。今年，我们分离了编码这些候选蛋白并构建大肠杆菌表达系统的基因，并使用所获得的表达酶创建抗体。我们计划通过免疫沉淀研究体外结合活性。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Starch Properties of the Sago Palm (Metroxylon sago Rotth.) in Different Soils

西米棕榈 (Metroxylon sago Rotth.) 在不同土壤中的淀粉特性

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Plant Foods for Human Nutrition 59(3)
影响因子：
0
作者：
Takahashi;A;Yumiko Obana et al.;Takeshi Senoura eet al.;Kouichi Nozaki et al.
通讯作者：
Kouichi Nozaki et al.

Characterization of Starch Synthase I and II Expressed in Early Developing Seeds of Kidney Bean (Phaseolus vulgaris L.)

芸豆 (Phaseolus vulgaris L.) 早期发育种子中表达的淀粉合酶 I 和 II 的表征

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry 68(9)
影响因子：
0
作者：
Takahashi;A;Yumiko Obana et al.;Takeshi Senoura eet al.
通讯作者：
Takeshi Senoura eet al.

Functional characteristics of C-terminal regions of starch-branching enzymes from developing seed of kidney bean (Phaseolu vulgaris L.)

菜豆 (Phaseolu vulgaris L.) 种子发育过程中淀粉分支酶 C 末端区域的功能特征

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Plant Science 166(5)
影响因子：
0
作者：
Takahashi;A;Yumiko Obana et al.;Takeshi Senoura eet al.;Kouichi Nozaki et al.;Hiroyuki Ito et al.
通讯作者：
Hiroyuki Ito et al.

Enhanced turnover of transitory starch by expression of up-regulated ADP-glucose pyrophosphorylases in Arabidopsis thaliana

DOI：
10.1016/j.plantsci.2005.07.019
发表时间：
2006-01-01
期刊：
PLANT SCIENCE
影响因子：
5.2
作者：
Obana, Y;Omoto, D;Ito, H
通讯作者：
Ito, H

Plant Cell Monographs

植物细胞专着

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
0
作者：
Takahashi;A;Yumiko Obana et al.;Takeshi Senoura eet al.;Kouichi Nozaki et al.;Hiroyuki Ito et al.;Haruhiko Washida et al.
通讯作者：
Haruhiko Washida et al.