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哺乳類精子の室温保存法の開発

哺乳动物精子室温保存方法的开发

基本信息

批准号：
15681014
负责人：
若山照彦
金额：
$ 19.05万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

卵子及び精子の凍結保存には定期的な液体窒素の補充が不可欠であり、長期間安全に維持するためには膨大な経費が必要である。そこで我々は精子および卵子の簡便な室温(非凍結)保存法の開発を試みた。従来の凍結保存に使われている試薬(グリセロールなど)は非凍結保存では毒性を示し、保存後の精子から産子を作ることはできなかった。しかし我々は高濃度のNaClを保存液に加えると精子の保存性が促進されることを発見した。この「塩漬け」方法では、保存中の精子の先体部が破けるなどのダメージが生じ、すべての精子が保存直後に死滅してしまうが、顕微受精技術によってそれらの精子を卵子内へ注入することで室温では10日間、4℃では2ヶ月間保存しても高率に産子へ発育させることが可能になった(Thaun et al., 2005)。これは従来の記録(室温で3日、4℃で1週間)を大幅に塗り替えている。以前我々は精子の凍結乾燥法を開発したが、今回の方法は高価な凍結乾燥機を必要とせず、より簡便な方法である。一方我々はこの方法が卵子にも効果があるかどうか検討してみた。その結果室温で24時間保存した卵子から顕微受精によって産子を作出することに世界で始めて成功した(Wakayama et al., 2004)。これまで卵子の室温保存は数時間が限度とされていたことから、本方法は精子だけでなく卵子においても有効であることが示されている。これらの研究から生殖細胞の保存にはDNAにダメージがなければ、細胞の生き死には重要ではないことが明らかとなった。また我々は生殖細胞を持たない不妊マウスからでも、体細胞核移植技術などを利用して子孫を作出する方法も開発中である(Wakayama et al., 2005)。

Egg and sperm freezing and preservation of regular fluid supply is not short, long-term safety and maintenance of the cost of expansion is necessary The development of simple room temperature (non-freezing) preservation method for sperm and eggs was tried. In the case of frozen preservation, the sperm is not stored in the frozen state. The addition of high concentrations of NaCl to the preservation solution promotes sperm preservation. This method of microfertilization may be used to preserve sperm precursors for 10 days at 4℃ for 2 months at a high fertility rate (Thaun et al., 2005)。This is the record of the coming of the book (room temperature <$3 days, 4℃ <$1 week). In the past, we have developed a freeze-drying method for sperm, but now we have a simple method for freeze-drying. A party to the method of egg production. The results of 24-hour room temperature preservation of eggs, microfertilization, birth, and the world's first success (Wakayama et al., 2004)。The method has the advantages that the egg can be stored at room temperature for a limited time, and the sperm can be stored at room temperature for a limited time. The study of germ cell preservation is important for the survival of germ cells. Wakayama et al.(2001),"Somatic Cell Nuclear Transplantation"(Wakayama et al., 2005)。