核の初期化促進方法の確立およびクローン胚から作成したntES細胞の正常性の検討

促进核重编程的方法的建立以及克隆胚胎产生的ntES细胞正常性的检查

基本信息

批准号：
15080211
负责人：
若山照彦
金额：
$ 69.31万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はクローン動物および体細胞由来ntES細胞を効率よく作出する方法の開発および初期化のメカニズムの解明を試みている。昨年我々はntES細胞と受精卵由来のES細胞には違いが見られないことを証明したが、19年度はさらに詳しい比較と倫理問題の解決を試みた。我々は核移植の影響を調べるために、単為発生ES細胞を用いた遺伝子発現解析法を確立し、これによってついに我々は特定の遺伝子におけるメチル化状態について、ntES細胞とES細胞の間に違いがあることを発見した。現在このntES細胞特異的なDNAメチル化状態の違いが、その後の細胞分化や応用にどのような影響を与えるのか解析中である(Hikichi, et. al., 2007,2008)。一方倫理問題の解決については2つのアプローチを試みた。体外受精に失敗した卵子は、加齢により質が低下することから廃棄されている。この廃棄卵子を用いれば健康な女性から卵子を提供してもらうという倫理問題は解決する。そこでマウスを用いたモデル実験を行った結果、体外受精に失敗した卵子でも核移植およびntES細胞の作成には問題ないことを明らかにした(Wakayama, et. al., 2007a)。この成果は多数の全国紙やテレビで紹介された。また、胚を殺さずに1割球(細胞)を取り出し、そこからES細胞を樹立する手法を開発し、生命の萌芽である胚を壊すという問題についても回避できることを明らかにした(Wakayama, et. al., 2007b)。他に核移植技術をより簡素化した手法についての研究も報告した(Kishigami, et. al., 2007;Wakayama, et. al., 2008)。

我们正在尝试开发有效产生克隆动物和体细胞衍生的NTES细胞的方法，并阐明重编程机制的机制。去年，我们证明了NTES细胞和受精卵衍生的ES细胞之间没有差异，但是在2019年，我们试图对其进行详细比较并解决伦理问题。为了研究核转移的作用，我们使用孤发性ES细胞建立了一种基因表达分析方法，最后发现NTES细胞和ES细胞之间在特定基因的甲基化状态中存在差异。目前，我们正在分析NTES细胞特异性DNA甲基化状态中的这种差异如何影响随后的细胞分化和应用（Hikichi等，等，2007，2008）。另一方面，我们尝试了两种解决道德问题的方法。由于其质量随着年龄的增长而降低，因此在体外受精失败的卵被丢弃。使用这种废物卵将解决让健康女性捐赠鸡蛋的道德问题。因此，我们使用小鼠进行了模型实验，发现即使在体外受精失败的卵也不是核转移和NTES细胞的问题（Wakayama等，等，2007a）。该结果已在许多国家报纸和电视台中展出。我们还开发了一种消除10个溴细胞（细胞）的方法，而无需杀死胚胎并从中建立ES细胞，并揭示了破坏胚胎的问题，即生命的胚胎，这是生命的发源地（Wakayama，et。Al。，2007b）。他还报告了对简化核转移技术的方法的研究（Kishigami等，2007； Wakayama等，等，2008）。