神経細胞死におけるCdk5活性化サブユニットp35の限定分解

Cdk5 激活亚基 p35 在神经元细胞死亡中的有限降解

• 批准号: 15700291
• 负责人: 斎藤 太郎
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15700291/
• 关键词: Cdk5; 神経細胞死; 小胞体ストレス; カルパイン; Cdk

サイクリン依存性キナーゼ5(Cdk5)の神経特異的な活性化サブユニットp35が神経細胞死の過程でカルパインによりp25へ限定分解されることが知られている。しかし、このp35の限定分解の神経細胞死における意義は明らかでない。前年度の初代培養神経細胞を用いた研究から、この限定分解が特に小胞体ストレスによって誘導される神経細胞死で顕著であること、またCdk5の特異的阻害剤により小胞体ストレスによる神経細胞死が抑制されたことからCdk5と小胞体ストレスによる神経細胞死との関係が示唆された。本年度はさらに小胞体ストレスによる神経細胞死とCdk5の関係を明らかにするために、p35^<-/->マウスから調製したp35を発現していない神経細胞を用いて小胞体ストレスによる神経細胞死を検討した。p35^<-/->とp35^<+/+>の培養神経細胞をTunicamycin、Thapsigarginにより小胞体ストレスを加えて細胞死を誘導し、細胞死の進行をカスパーゼの活性化を指標として比較したところ、p35^<-/->とp35^<+/+>でカスパーゼの活性化に有意な差は見られなかった。そこでRNA干渉法により急性にp35の発現を抑制することを考え、有効なshRNA発現系の作製に着手した。その結果、p35を発現抑制できるshRNAを神経細胞に効率よく発現できるアデノウイルスベクターを構築することができた。現在、このp35発現抑制系を用いて解析を行っているところである。

サ イ ク リ ン dependency キ ナ ー ゼ 5 (Cdk5) の god 経 specific な activeness サ ブ ユ ニ ッ ト p35 が god 経 の cell death process で カ ル パ イ ン に よ り p25 へ finite decomposition さ れ る こ と が know ら れ て い る. The significance of the における meaning of the death of the cells in the <s:1> Shinto sutras, <s:1> Ming ら でな でな. At the beginning of the annual の training before resting to restore energy 経 cells を using い た research か ら, こ の finite decomposition が に especially small cell body ス ト レ ス に よ っ て induced さ れ る 経 cell death god で 顕 the で あ る こ と, ま た Cdk5 の specific resistance against tonic に よ り small cell body ス ト レ ス に よ る 経 cell death god が inhibition さ れ た こ と か ら Cdk5 と small cell body ス ト レ ス に よ る god 経 cells Death と と is related to が indicates された. This year は さ ら に small cell body ス ト レ ス に よ る 経 cell death god と Cdk5 の masato を and Ming ら か に す る た め に, p35 ^ < - / - > マ ウ ス か ら modulation し た p35 を 発 now し て い な を 経 cells with い い god て small cell body ス ト レ ス に よ る 経 cell death god を beg し 検 た. P35 ^ < - / - > と p35 ^ + / + < > の culture god 経 cell を Tunicamycin, Thapsigargin に よ り small cell body ス ト レ ス を plus え て induced cell death を し, cell death の を カ ス パ ー ゼ の activeness を index と し て compare し た と こ ろ, p35 ^ < - / - > と p35 ^ < + / +>でカスパ でカスパ ゼ ゼ でカスパ activation に intentional な difference ゼ see られな った った った. そ こ で RNA dry involved method に よ り acute に p35 の 発 now を inhibit す る こ と を え test, a sharper な shRNA 発 に to the now is の cropping し た. そ の results, p35 を 発 now inhibit で き る shRNA を god 経 cells に sharper rate よ く 発 now で き る ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を build す る こ と が で き た. Now, the occurrence inhibition of <s:1> on p35 is を. Analyze the を line って ると ると ろである ろである ろである ろである ろである ろである.

项目成果

Demonstration of a role for alpha-synuclein as a functional microtubule-associated protein.

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Alzheimer's disease : JAD
• 作者: M. Alim;Qiu-lan Ma;K. Takeda;T. Aizawa;M. Matsubara;Minako Nakamura;A. Asada;Taro Saito;H. Kaji;M. Yoshii;S. Hisanaga;K. Uéda

Saito, T. et al.: "Developmental regulation of the proteolysis of the p35 Cyclin-Dependent Kinase 5 Activator by Phosphorylation."J.Neurosci.. 23. 1189-1197 (2003)

Saito, T. 等人：“通过磷酸化对 p35 细胞周期蛋白依赖性激酶 5 激活剂的蛋白水解进行发育调节。”J.Neurosci.. 23. 1189-1197 (2003)

Tomizawa, K. et al.: "Cophosphorylation of Amphiphysin I and Dynamin I by Cdk5 regulates clathrin-mediated endocytosis of synaptic vesicles"J.Cell Biol.. 163. 813-824 (2003)

Tomizawa, K. 等人：“Cdk5 对 Amphiphyn I 和 Dynamin I 的共磷酸化调节网格蛋白介导的突触小泡内吞作用”J.Cell Biol.. 163. 813-824 (2003)

Honma, N. et al.: "Apoptosis-associated tyrosine kinase is a Cdk5 activator p35 binding protein."Biochem Biophys Res Commun.. 310. 398-404 (2003)

Honma, N. 等人：“细胞凋亡相关酪氨酸激酶是 Cdk5 激活剂 p35 结合蛋白。”Biochem Biophys Res Commun.. 310. 398-404 (2003)

Takahashi, S., Saito, T.et al.: "Phosphorylation by Cyclin-dependent Kinase 5/p39 during Brain Development Reduces Its Affinity for Microtubules."J.Biol.Chem.. 278. 10506-10515 (2003)

Takahashi, S., Saito, T.et al.：“大脑发育过程中细胞周期蛋白依赖性激酶 5/p39 的磷酸化降低了其对微管的亲和力。”J.Biol.Chem.. 278. 10506-10515 (2003)