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IP_3/Ca^<2+>シグナリングの空間的制御機構の研究

IP_3/Ca^<2+>信号空间控制机制研究

基本信息

批准号：
16770124
负责人：
坂内博子
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

IP_3受容体は細胞内小胞体からのカルシウム放出を担うチャネルの一つであり,その機能は時間的空間的に厳密に制御されている.IP_3受容体の局在がカルシウム放出の空間的制御に寄与していると予想されているが,カルシウムシグナルとIP_3受容体の局在を関連づけた研究はこれまで行われていない.MDCK細胞のIP_3受容体タイプ1は,sub-confluent状態では細胞全体のER膜上に存在しconfluent状態ではER膜から離れて細胞膜近傍に局在することが知られているので,IP_3受容体の位置変化にともなって"量子的IP_3依存的カルシウム放出"(Ca^<2+> puff)の位置もsub-confluentとconfluentで変化するか否かを,全反射顕微鏡を利用したカルシウムイメージング法で調べた.実験初期の段階で,MDCK細胞はconfluencyに関わらず自発的なカルシウム流入を常に行っていることを見いだした.このカルシウム流入は細胞外カルシウム濃度依存的であり,Ca^<2+> puffと同様量子的に観察された.Ca^<2+> puffをこの量子的カルシウム流入と区別するために,本研究では細胞外カルシウム非存在下でCa^<2+> puffの測定を行った.カルシウム指示薬にFluo-4,細胞膜のラベルにoctadecyl rhodamine B chlorideを用いることにより,Ca^<2+> puffの細胞の位置情報が得られる実験系を確立した.現在実験で得られたデータをもとに細胞膜とCa^<2+> puffがおこる場所との関係を解析し,sub-confluentとconfluentで差があるかどうかを統計的に検討している.また,MDCK細胞における自発的な量子的カルシウム流入は新しい知見であり,腎臓におけるカルシウムの再吸収に関わる可能性が考えられる.このためカルシウム流入を担うチャネルを同定するために,薬理学的実験を行っている.

The small cell bodies of the IP_3 acceptor are responsible for the release of the small cell body. The receiver is responsible for the release of the device. The IP _ 3 recipient bureau is responsible for the control of the release of the receiver in the space of the receiver. IP _ 3 is responsible for the control and delivery of the space in which the receiver is released. The IP _ 3 acceptor office is in charge of the study of the IP _ 3 receptor. it is known that there is a confluent status on the whole ER membrane of the IP_3 receptor. there is a confluent status on the confluent membrane. The position of the IP_3 acceptor is changed, and the quantum IP_3-dependent emission of IP_3 is released (Ca ^ & lt). (2) the position of sub-confluent (puff) is different from that of the total reflection, and the total reflection is different from that of the total reflection. In the early days of this period, the MDCK cell is in the middle of a period of time, and the data flow from the confluency cell to the regular line. In this study, the measurement of Ca ^ & lt;2+> puff in the presence of extracellular temperature in the presence of Ca ^ & lt;2+> puff is studied. In this study, the flow rate of extracellular temperature is different from that of extracellular temperature. CA ^ & lt;2+> puff is the same as that of the quantum. The location of the cell is confirmed by the location of the cell, the membrane, the Fluo-4, the membrane, the octadecyl rhodamine B chloride, the location of the cell, the location of the cell, In this paper, we have obtained the results of the analysis of the membrane of cell membrane Ca ^ & lt;2+> puff confluent, which is based on the statistics of the statistics of the cell membrane. The quantum quantum of the MDCK cell flows into the new information, the possibility of re-inhalation. In this case, the information flow into the system is the same as that of the doctor.