权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

味細胞内情報伝達系におけるCa^<2+>シグナリングとK^+チャンネル機能の生理学的解析

味觉细胞信号转导系统中Ca^2+信号和K^+通道功能的生理分析

基本信息

批准号：
16770139
负责人：
三好美咲
金额：
$ 1.98万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770139/
关键词：
味覚受容 PLCβ2

项目摘要

本研究では、味覚受容におけるカルシウムシグナリングの重要性をふまえ、味細胞で発現するカルシウム依存性カリウムチャンネルether-a-go-go(eag)の機能の解析を目的としている。昨年度までは、ドミナント機能を持つ変異チャンネルをツメガエル卵母細胞で発現させ、その機能検定を行った。本年度は、このドミナントネガティブeagチャンネルを用いて、コンディショナルにeagチャンネル機能を阻害するトランスジェニック動物の作製を目指した。まず、これに先立って、解析をより効率的に行うためにトランスジェニック動物としてマウスを用いることが出来るかどうか検討した。味細胞特異的に発現させるためにラットPLCβ2遺伝子の上流領域をコンストラクトに用いるが、これについてはマウスに導入した場合も味細胞特異的に働く。そこで、すでに作成済みの抗ラットeag抗体がマウスにおいても用いることが出来るかどうか確かめるため、ddyマウスの舌乳頭の抗体染色を行った。その結果、マウス有郭乳頭においてもeagの染色が確認されたが、その染色強度はラットに比べて弱く、マウスでトランスジェニック動物を作製した場合には発現量を感度よくモニターする点に問題があることが分かった。したがって、トランスジェニック動物としてはラットを用いるほうがよいと結論した。その一方で、味細胞においてPLCβ2と同一の細胞に発現し、その下流で活性化すると予想されているもうひとつのイオンチャンネルTRPM5と、eagチャンネルをツメガエル卵母細胞に共発現させ、機能の関わりを調べる実験も進めている。最近報告されたTRPM5のノックアウトマウスの結果から、実際の味細胞では複数のイオンチャンネルが協働して情報伝達を担っている可能性が考えられ、トランスジェニック動物を用いた解析において、他のチャンネルとの関わりを考慮していく必要がでてきたからである。

This study reveals the importance of taste tolerance and taste cells’ appearance.ムDependencyカリウムチャンネルether-a-go-go(eag)の functionのanalyticをpurposeとしている. Yesterday's year's までは, ドミナントfunction を変different チャンネルをツメガエルoocyte で発appears させ, そのfunction 検定を行った. This year's は、このドミナントネガティブeagチャンネルを use いて、コンディショナルにeag チャンネル function を hinder するトランスジェニック animal のを目 Refers した.まず, これに前立って, に行うためにトランスジ which analyzes をよりefficiencyェニックAnimal としてマウスを Use いることが出るかどうか検した. Taste cell-specific に発成させるためにラットPLCβ2 缝子の上区をコンストRakuten uses いるが and これについてはマウスに to introduce the した occasion もgust cell-specific に働く.そこで、すでに用いることが出るかどうか真かめるため, ddyマウスのANTIBODINE Staining of tongue papilla を行った. The result of その, the staining intensity of そのはラットに is weaker than that of べてく, マウStructural materialをsensitivityよくモニターするpointにquestionがあることが分かった.したがって、トランスジェニックAnimal としてはラットを Use いるほうがよいと Conclusion した.その Party で, taste cell においてPLCβ2 と same の cell に発appear し, その下でactivation すると月思されているもうひとつのイオンチャンネルTRPM5と、eagチャンネルをツメガエルOVOE The cells are in harmony and the functions are in harmony. Recent reports: TRPM5 TRPM5's results and results Taste cell plural noun Possibility test, トランスジェニックanimal, analysis by いた, His のチャンネルとの关わりを considers the necessary していくがでてきたからである.