糸状菌におけるフェニルアラニンアナログが引き起こすチューブリン関与の形態異常

丝状真菌中苯丙氨酸类似物引起的微管蛋白相关形态异常

• 批准号: 16780062
• 负责人: 藤田 憲一
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16780062/
• 关键词: 出芽酵母; 偽菌糸形成; 細胞骨格; チューブリン; イソアミルアルコール; 微小管; L-2,5-dihydrophenylalanine; Aspergillus nidulans; microtubule; tubulin; morphological change; Saccharomyces cerevisiae

出芽酵母Saccharomyces cerevisiaeは、糸状菌とは異なり、通常の培養条件下では酵母状の丸い細胞形態を示すが、イソアミルアルコール(IAA)存在下で、細胞が伸張し出芽が形成された後も娘細胞の分離が遅れて伸長し続け、偽菌糸型の形態を示すことが知られている。今回、細胞の形態が偽菌糸に変化するときに起こっていると予想される細胞骨格分子(チューブリンおよびアクチン)への影響について調べた。まず、ウェスタン解析の結果、IAAによる偽菌糸形成時にα-およびβ-チューブリン量が相対的に低下し、アクチンは低下しないことが明らかになった。加えてFACS解析の結果、アクチン量は細胞容積の増大と共に比例するが、チューブリンのそれは相対的に減少していくことがわかった。しかし顕微鏡下では紡錘体の消失は観察されず、染色体分配は正常に進行しているものとしていないものの両方が観察された。さらにチューブリン消失の原因がmRNAへの転写阻害によるものかをRT-PCR法によって調べたが、mRNAの発現量にコントロールとの大きな差違は認められなかった。また免疫沈降法によりα-チューブリンを精製したが、ユビキチン化されたものは検出されなかった。従って、現在のところ、相対チューブリン量の低下の原因は不明である。しかしながら、フェニルアラニン誘導体以外にも糸状菌の形態異常とチューブリン量の低下に相関が見られる化合物が見いだされ、それはIAAであることがわかった。

Budding yeast Saccharomyces Cerevisiae は, si bacteria と は different な り, usually の cultivation conditions で は yeast shaped の pill い cells form を shown す が, イ ソ ア ミ ル ア ル コ ー ル で, cells in the presence of (IAA) が stretching し budding が form さ れ た も niang の isolated after が 遅 れ て elongation し 続 け, pseudo bacteria type si を の form shown す こ と が know ら れ て い る. Today, cell の form が pseudo bacteria si に variations change す る と き に up こ っ て い る と to think さ れ る bone cells (チ ュ ー ブ リ ン お よ び ア ク チ ン) へ の influence に つ い て adjustable べ た. ま ず, ウ ェ ス タ ン analytical の results, IAA に よ る pseudo bacteria si formed に alpha お よ び beta チ ュ ー ブ リ ン が phase of low に し seaborne, ア ク チ ン は low し な い こ と が Ming ら か に な っ た. Add え て analytical の results, both FACS ア ク チ ン quantity は の raised large と に total cell volume proportion す る が, チ ュ ー ブ リ ン の そ れ は phase of seaborne に reduce し て い く こ と が わ か っ た. し か し 顕 micro microscopically で は spindle の disappear は 観 examine さ れ ず, chromosome distribution on normal に は し て い る も の と し て い な い も の の struck party が 観 examine さ れ た. さ ら に チ ュ ー ブ リ ン disappearance の が mRNA へ の planning write resistance against に よ る も の か を rt-pcr method に よ っ て adjustable べ た が, mRNA の 発 now quantity に コ ン ト ロ ー ル と の big き な poor violations は recognize め ら れ な か っ た. ま た immune sink method に よ り alpha チ ュ ー ブ リ ン を refined し た が, ユ ビ キ チ ン change さ れ た も の は 検 out さ れ な か っ た. Youdaoplaceholder0, currently, 従って と ろ ろ, compared with チュ 従って ブリ ブリ, the <s:1> quantity is <s:1> low, the <s:1> reason is である unknown である. し か し な が ら, フ ェ ニ ル ア ラ ニ ン induced body outside に も si form bacteria の abnormal-looking と チ ュ ー ブ リ ン low quantity の に phase masato が see ら れ る compound が see い だ さ れ, そ れ は IAA で あ る こ と が わ か っ た.

项目成果

Screening for Microtubule-Disrupting Antifungal Agents by Using a Mitotic-Arrest Mutant of Aspergillus nidulans and Novel Action of Phenylalanine Derivatives Accompanying Tubulin Loss

• DOI: 10.1128/aac.48.5.1739-1748.2004
• 发表时间: 2004-05
• 期刊: Antimicrobial Agents and Chemotherapy
• 影响因子: 4.9
• 作者: T. Kiso;Ken-Ichi Fujita;X. Ping;Toshio Tanaka;M. Taniguchi

新しい微小管阻害剤を発見-チューブリン消失を伴うフェニルアラニン誘導体とは-

发现一种新的微管抑制剂 - 什么是导致微管蛋白消失的苯丙氨酸衍生物？

• 发表时间: 2004
• 期刊: 化学と生物 42巻12号
• 作者: Irie;T.;H.matsumura;R.Terauchi;H.Saitoh.;藤田 憲一
• 通讯作者: 藤田 憲一