細胞外マトリックスペプチドによる細胞遊走と増殖の解析

使用细胞外基质肽分析细胞迁移和增殖

基本信息

批准号：
16790233
负责人：
望月早月
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、Matrix metalloproteinases 2 (MMP-2)ノックアウト(MMP-2 KO)マウスやMMP-2特異的阻害剤を用いてマウス心筋梗塞モデルにおける細胞外マトリックスの分解とマクロファージ(Mφ)遊走機構について検討を行った。MMP-2 KOマウスとMMP-2阻害剤投与マウスではワイルドタイプ(WT)マウスに比べて急性心筋梗塞後の心破裂を抑制し、生存率が著しく改善された。梗塞心筋へのMφの遊走を免疫染色で比較すると、WTマウスに比較し、MMP-2 KOマウスやMMP-2阻害剤投与マウスでは有意に抑制されていた。Gelatin zymography及びin situ zymographyより、WTマウスの心筋梗塞部ではMMP-2の活性化が見られるのに対し、MMP-2阻害剤投与マウスでは有意に抑制され、MMP-2 KOマウスではMMP-2活性は認められなかった。免疫染色及びイムノブロットの結果から、WTマウスの心筋梗塞部ではラミニンやフィブロネクチンの分解が促進していた。さらに、invasion assayによる心筋梗塞部心筋に対するMφの遊走は、非梗塞部もしくはシャムオペレーションの心筋に比べて著明であった。ラミニンペプチドやフィブロネクチンペプチドでエラスチンラミニンレセプターやインテグリンα5β1をブロックしたMφでは心筋梗塞部心筋への遊走が抑制された。これらのことから、MMP-2 KOマウスやMMP-2阻害剤を投与したマウスでは、壊死心筋部の細胞外マトリックス分解が抑制され、急性心筋梗塞の予後が著しく改善された。また、梗塞心筋巣へのMφの遊走は、心筋梗塞後に活性化されたMMP-2によりラミニンやフィブロネクチンが分解され、その分解産物が梗塞心筋巣へMφの浸潤を誘導していると推定された。

在这项研究中，我们使用基质金属蛋白酶2（MMP-2）基因敲除（MMP-2 KO）小鼠和MMP-2特异性抑制剂研究了小鼠心肌梗死模型中细胞外基质和巨噬细胞（Mφ）迁移机制的降解。与野生型（WT）小鼠相比，MMP-2 KO小鼠和MMP-2抑制剂治疗的小鼠抑制急性心肌梗塞后的心脏破裂，并显着提高了存活率。当将Mφ与免疫染色的迁移到梗死心肌的迁移时，与WT小鼠相比，它在MMP-2 KO小鼠和用MMP-2抑制剂治疗的小鼠中受到了显着抑制。明胶Zymography和原位酶学表明，在WT小鼠的心肌梗塞中观察到MMP-2激活，而MMP-2抑制剂治疗的小鼠被显着抑制，并且在MMP-2 KO小鼠中未观察到MMP-2活性。免疫染色和免疫印迹结果表明，在WT小鼠的心肌梗塞中促进层粘连蛋白和纤连蛋白的降解。此外，通过入侵测定法将Mφ迁移到心肌梗死心肌比非障碍或假手术心肌的迁移更为明显。 Mφ通过层粘连蛋白肽和纤连蛋白肽阻断弹性蛋白层粘连蛋白受体和整联蛋白α5β1抑制了迁移到心肌心跳梗塞。从这些结果中，在MMP-2 KO小鼠中抑制了坏死心肌区域的细胞外基质降解，并用MMP-2抑制剂给药，并且急性心肌梗塞的预后得到了显着改善。据估计，Mφ迁移到梗死心肌病变中被MMP-2降解，MMP-2在心肌梗塞后被激活，MM或Mφ的降解产物诱导Mφ侵袭进入梗死的心肌病变。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

プロテアーゼ(関節リウマチ-成因研究からの治療の新時代へ-)

蛋白酶（类风湿性关节炎 - 从病因研究到治疗新时代）

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
日本臨床 63
影响因子：
0
作者：
Fujii C.;Tsuneyama K.;et al.;Misuzu Shimakage et al.;Suizu F et al.;Ryo A et al.;Ryo A et al.;Osamu Nakagawasai;Shin-ichiro Matsumura;Mochizuki S et al.(3番目/6名);望月早月(1番目/3名)
通讯作者：
望月早月(1番目/3名)

Targeted deletion or pharmacological inhibition of MMP-2 prevents cardiac rupture after myocardial infarction in mice