C型肝炎ウイルス蛋白質NS5BによるIRF3活性化機構の解析

丙型肝炎病毒蛋白NS5B激活IRF3机制分析

• 批准号: 16790273
• 负责人: 仲 一仁
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kanazawa University (2005)Okayama University (2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790273/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; NS5B; RNA依存RNAポリメラーゼ; IFN-β; TLR3; IRF-3; 細胞周期; DNA修復

C型肝炎ウイルス(HCV)の持続感染におけるTLR3シグナル経路の活性化機構,及び慢性肝炎発症から肝細胞癌発症に至るメカニズムは明らかではない.そこで.ヒト非癌不死化肝細胞株を用いてHCV蛋白質の細胞周期進行に及ぼす影響を解析した.ヒト非癌不死化肝細胞株PH5CH8,並びにNKNT-3細胞を用いてHCV構造蛋白質コアと非構造蛋白質NS3,NS4A,NS4B,NS5A,及びNS5Bの発現系を構築して細胞周期の進行を解析した結果,NS5B発現細胞においてS期の進行が遅延していることが明らかになった.このS期進行阻害はNS5B発現細胞におけるIFN-βの発現誘導に起因していた.IFN-βの誘導やS期の進行阻害は,NS5B発現細胞にTLR3に対するsiRNAを処理してTLR3の発現を抑制すると解消されることから,TLR3依存的にIRF-3シグナル経路を活性化され,IFN-βの産生が誘導されたと考えられる.ゲノムDNAの損傷時におけるDNA修復は遺伝情報を正確に伝達する上で極めて重要であり,その異常は発がんの原因になると考えられている.そこでNS5B発現による細胞周期の進行阻害がDNA修復異常を引き起こす可能性を検証した.NS5B発現細胞をDNAアルキル化剤(MMS),過酸化水素,DNA一本鎖切断を引き起こすUV-B,DNA二本鎖切断を引き起こすAdriamycinやNeocarzinostatinで処理し,その後のDNA修復能をコロニー形成を解析した結果,DNA二本鎖切断を引き起こす処理をした場合NS5B発現細胞のコロニー形成数が著しく減少することが明らかになった.以上の結果,NS5B発現細胞において細胞周期のS期の進行が遅延してDNA損傷に対する感受性が増強することが明らかとなり,NS5B蛋白質が肝発がんに関与する可能性が示唆された.

Hepatitis C virus (HCV) infection is caused by the activation mechanism of TLR3 and chronic hepatitis.らHepatocellular Carcinoma に to るメカニズムは明らかではない.そこで.ヒト Non-cancerous immortalized liver cell strain いてHCV protein Analysis of cell cycle progression and effects on non-cancerous immortalized liver cell line PH5CH8 and NKNT-3 cells using HCV structural proteins and non-structural proteins NS3, NS4A, NS4B, NS5A, and NS5B. The results of the system's construction and analysis of the progress of the cell cycle, and the progress of the S phase of the NS5B-present cells have not been confirmed. IFN-β is the cause of NS5B cells that are blocked in the S phase. IFN-β is induced. N-β is induced and blocked in S phase, NS5B appears in cells and TLR3 is treated with siRNA. IRF-3-dependent activation of TLR3-dependent IRF-3, IFN-βのgenesisがinducingされたと考えられる.ゲノムDNA damageにおけるDNA repairは伝informationをcorrectに伝达するThe reason for the abnormality of the upper limit is the reason for the abnormality. The cause of the abnormality is the test. The possibility of abnormality in DNA repair caused by the abnormality of DNA repair in the period is not confirmed. MMS), overacidified water, UV-B for DNA one-lock cutting and inducing, DNA two-lock cutting and inducing for Adria MycinやNeocarzinostatinでprocessingし,その后のDNA repair energyをコロニーformationをanalyticsしAs a result, the DNA double lock was cut and the number of cells formed was reduced when NS5B was treated. The above results show that NS5B appears in cells and does not cause DNA damage in the S phase of the cell cycle. The sensitivity of the NS5B protein has increased, the sensitivity has increased, and the NS5B protein has become more likely to be affected.

项目成果

Hepatitis C virus NS5B delays cell cycle progression by inducing IFN-β via Toll-like receptor 3 signaling pathway without replicating viral genomes

丙型肝炎病毒 NS5B 通过 Toll 样受体 3 信号通路诱导 IFN-β 延迟细胞周期进程，而不复制病毒基因组

• 发表时间: 2006
• 期刊: Virology (印刷中)
• 作者: Naka;K.;Dansako;H.;Kobayashi N.;Ikdeda M.;Kato N.
• 通讯作者: Kato N.