ヒト組織感染モデルによるヒト免疫不全ウイルス間の相互作用からみた病態の解析

使用人体组织感染模型分析人类免疫缺陷病毒之间相互作用的病理状况

• 批准号: 16790281
• 负责人: 伊藤 嘉規
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790281/
• 关键词: ヒト免疫不全ウイルス; 共感染; ヒトリンパ組織モデル; リアルタイムPCR法; 定量PCR法

1.HIV-1感染症を引き起こすウイルスのサブタイプである、R5指向性HIV-1(R5 HIV-1)、X4指向性HIV-1(X4 HIV-1)およびR5X4両指向性HIV-1(R5X4 HIV-1)の3種の相互作用を検討するためのモデルについて検討した。医学的理由で摘出された健常扁桃組織を小片に切り分けて作成したヒトリンパ組織モデルにおいて、それぞれのプロトタイプとして、増殖曲線が同様で、均一なウイルスストックが得られやすいものとして、SF162(R5 HIV-1)、LAV.04(X4 HIV-1)および89.6(R5X4 HIV-1)を選択した。さらに、これらの組み合わせにおいて、それぞれのウイルスを他の2つのウイルス存在下で、正確に定量できるようなプライマーの設定を試みた。gp120遺伝子内の部位に設定したプライマーにより、こうしたことが可能なリアルタイム定量PCRアッセイを確立した。上記3種のウイルスを共感染させた場合は、R5 HIV-1の増殖は抑制され、X4 HIVとRSX4 HIV-1の増殖は競合阻害を示した。2.HIV-1およびHIV-2の相互作用については、SF162(R5 HIV-1)と7924A(HIV-2)の組み合わせ、およびLAV.04(X4 HIV-1)と7924A(HIV-2)の組み合わせにおいて共感染モデルおよびリアルタイム定量PCRアッセイを確立した。この場合のプライマーは、HIV-1についてはvpu遺伝子(HIV-2にはない)領域に設定し、HIV-2についてはvpr遺伝子(HIV-1とHIV-2で相同性が低い)領域に設定した。上記2組の共感染実験の結果、HIV-2はR5 HIV-1に対して、X4 HIV-1はHIV-2に対して増殖を抑制した。この現象を説明できる因子について解析をすすめている。

1. HIV-1 infection is caused by HIV-1 infection, R5-directed HIV-1(R5 HIV-1), X4-directed HIV-1(X4 HIV-1) and R5X4-directed HIV-1(R5X4 HIV-1). The medical reasons for this are to extract healthy amygdala tissue from small pieces of tissue, to make them into tissue samples, to select from among the same, uniform growth curves, SF162(R5 HIV-1), LAV.04(X4 HIV-1), and 89.6(R5X4 HIV-1). In the presence of other elements, the correct amount of elements should be determined. Gp120 gene position settings are established for quantitative PCR. The above three types of HIV co-infection, R5 HIV-1 proliferation inhibition, X4 HIV and RSX4 HIV-1 proliferation inhibition 2. The interaction between HIV-1 and HIV-2 was established by quantitative PCR. The association between SF162 (R5 HIV-1) and 7924A (HIV-2) was established by LAV.04(X4 HIV-1). In this case, HIV-1 and HIV-2 are set in the domain of vpu gene (HIV-2 and HIV-2), and HIV-2 and HIV-2 are set in the domain of vpr gene (HIV-1 and HIV-2). The results of co-infection in the two groups above, HIV-2 versus R5 HIV-1, and X4 HIV-1 versus HIV-2, were described. This phenomenon is explained by the factor of analysis.