ヒト組織感染モデルによるヒト免疫不全ウイルス間の相互作用からみた病態の解析

使用人体组织感染模型分析人类免疫缺陷病毒之间相互作用的病理状况

• 批准号: 16790281
• 负责人: 伊藤 嘉規
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790281/
• 关键词: ヒト免疫不全ウイルス; 共感染; ヒトリンパ組織モデル; リアルタイムPCR法; 定量PCR法

1.HIV-1感染症を引き起こすウイルスのサブタイプである、R5指向性HIV-1(R5 HIV-1)、X4指向性HIV-1(X4 HIV-1)およびR5X4両指向性HIV-1(R5X4 HIV-1)の3種の相互作用を検討するためのモデルについて検討した。医学的理由で摘出された健常扁桃組織を小片に切り分けて作成したヒトリンパ組織モデルにおいて、それぞれのプロトタイプとして、増殖曲線が同様で、均一なウイルスストックが得られやすいものとして、SF162(R5 HIV-1)、LAV.04(X4 HIV-1)および89.6(R5X4 HIV-1)を選択した。さらに、これらの組み合わせにおいて、それぞれのウイルスを他の2つのウイルス存在下で、正確に定量できるようなプライマーの設定を試みた。gp120遺伝子内の部位に設定したプライマーにより、こうしたことが可能なリアルタイム定量PCRアッセイを確立した。上記3種のウイルスを共感染させた場合は、R5 HIV-1の増殖は抑制され、X4 HIVとRSX4 HIV-1の増殖は競合阻害を示した。2.HIV-1およびHIV-2の相互作用については、SF162(R5 HIV-1)と7924A(HIV-2)の組み合わせ、およびLAV.04(X4 HIV-1)と7924A(HIV-2)の組み合わせにおいて共感染モデルおよびリアルタイム定量PCRアッセイを確立した。この場合のプライマーは、HIV-1についてはvpu遺伝子(HIV-2にはない)領域に設定し、HIV-2についてはvpr遺伝子(HIV-1とHIV-2で相同性が低い)領域に設定した。上記2組の共感染実験の結果、HIV-2はR5 HIV-1に対して、X4 HIV-1はHIV-2に対して増殖を抑制した。この現象を説明できる因子について解析をすすめている。

1。我们研究了一个模型，研究了引起HIV-1感染的三种类型的病毒亚型的相互作用：R5导向的HIV-1（R5 HIV-1），X4指导的HIV-1（X4 HIV-1）（X4 HIV-1）和R5X4指导的HIV-1（R5X4 HIV-1）。在人类淋巴组织模型中，由于医学原因将去除的健康扁桃体组织切成小块而获得的SF162（R5 HIV-1），LAV.04（X4 HIV-1）和89.6（R5X4 HIV-1）获得了原型，从而获得了均匀曲线的原型，从而获得了均匀的扁桃体曲线，从而获得了均匀的扁桃体组织。此外，在这些组合中，试图在存在另外两种病毒的情况下准确地定量每种病毒。能够执行此操作的实时定量PCR分析是在GP120基因内的位点设置的底漆。当与上述三种病毒共感染时，R5 HIV-1的增殖被抑制，X4 HIV和RSX4 HIV-1的增殖显示出竞争性抑制。 2。对于HIV-1和HIV-2相互作用，在SF162（R5 HIV-1）和7924A（HIV-2）的组合中建立了共感染模型和实时定量PCR测定法，以及LAV.04（X4 HIV-1）和7924A（HIV-2）的组合。在这种情况下，将底漆设置为HIV-1的VPU基因（在HIV-2中未发现）和HIV-2（HIV-1和HIV-2之间的低同源性）的VPR基因。由于上述两个共感染实验，HIV-2抑制了针对R5 HIV-1和X4 HIV-1对HIV-2的生长。我们正在促进可以解释这种现象的因素的分析。