正常ヒト造血幹細胞の造血因子依存的細胞運動の分子機序解明

阐明正常人造血干细胞造血因子依赖性细胞运动的分子机制

• 批准号: 16790539
• 负责人: 加藤 隆幸
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790539/
• 关键词: 造血幹細胞; サイトカイン; 細胞内シグナル伝達; 低分子量G蛋白質Rho; RhoエフェクタROCK; MAPKファミリー; 細胞運動; 細胞骨格

申請者は、造血幹細胞が主とされるヒト正常CD34陽性細胞がサイトカインにより細胞伸展とfilopodia様突起形成を起こすことを見いだした。しかし、TNF及びGM-CSFでは細胞形態変化は観察されなかった。これは、通常運動しないとされるCD34陽性細胞の運動能獲得が特定のサイトカインで起こることを示している。この細胞構造体はF-actinから成ることを共焦点レーザー顕微鏡で明らかにした。アクチン細胞骨格の再構築がCD34陽性細胞の形態変化に関与し、更には細胞運動にも関与すると考えられる。Ras類似低分子量G蛋白質Rhoはエフェクター分子であるROCK及びmDia1を介してアクチン細胞骨格を制御し、細胞運動・細胞接着・細胞形態変化に関与する。CD34陽性細胞の運動、特にF-actinから成る細胞構造体形成におけるRho及びRho関連分子の機能解析を進めている。細胞運動解析の実験系を立ち上げるため、好中球を用いて生細胞解析のための諸条件の検討を行った。サイトカイン添加により好中球が細胞運動を開始した。ビデオ顕微鏡を用いて好中球のサイトカインによる細胞運動能の経時変化を解析した。MAPK阻害剤、ROCK阻害剤、PI-3 kinase阻害剤、抗インテグリン抗体で細胞運動が障害された。このことはMAPK、ROCK、PI-3 kinase及びインテグリンが好中球の細胞運動を制御することを示唆している。

The applicant is interested in hematopoietic stem cells and normal CD34-positive cells. Cell morphology changes due to TNF and GM-CSF CD34-positive cells can acquire specific motor activity. This cell construct is F-actin. The reconstruction of CD34-positive cells is related to the morphological transformation and cell movement. Ras-like low molecular weight G protein Rho is related to ROCK and mDia1 in cell skeleton control, cell movement, cell succession and cell morphology. CD34-positive cell movement, F-actin development, cell construct formation, functional analysis of Rho and Rho related molecules Cell movement analysis system is established, and the conditions for cell movement analysis are discussed. Add to cart A micro-microscope is used to analyze the time-dependent changes in cell motion energy. MAPK inhibitor, ROCK inhibitor, PI-3 kinase inhibitor, anti-inflammatory antibody and cell movement inhibitor This is the first time that MAPK, ROCK, PI-3 kinase and other enzymes have been used to control cell movement in the world.

项目成果

Actin reorganization and morphological changes in human neutrophils stimulated by TNF, GM-CSF, and G-CSF: the role of MAP kinases

• DOI: 10.1152/ajpcell.00131.2003
• 发表时间: 2004-01-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-CELL PHYSIOLOGY
• 影响因子: 5.5
• 作者: Kutsuna, H;Suzuki, K;Kitagawa, S
• 通讯作者: Kitagawa, S

Type I and type II interferons delay human neutrophil apoptosis via activation of STAT3 and up-regulation of cellular inhibitor of apoptosis 2

• DOI: 10.1189/jlb.1104690
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: JOURNAL OF LEUKOCYTE BIOLOGY
• 影响因子: 5.5
• 作者: Sakamoto, E;Hato, F;Kitagawa, S
• 通讯作者: Kitagawa, S

Activation of human neutrophils by granulocyte colony-stimulating factor, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, and tumor necrosis factor alpha : role of phosphatidylinositol 3-kinase.

粒细胞集落刺激因子、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子 α 激活人中性粒细胞：磷脂酰肌醇 3-激酶的作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Int.J.Hematol. 80(5)
• 作者: Sato K;Tateishi S;Kubo K;Mimura T;Yamamoto K;Kanda H;Saori Nishiki et al.;Sakamoto E.;Kutsuna H.;Kato T.;Kamata N.
• 通讯作者: Kamata N.

Proteolytic conversion of STAT3α to STAT3γ in human neutrophils -: Role of granule-derived serine proteases

• DOI: 10.1074/jbc.m400637200
• 发表时间: 2004-07-23
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kato, T;Sakamoto, E;Kitagawa, S
• 通讯作者: Kitagawa, S