骨粗鬆症治療への応用を目的としたコラーゲントリペプチドの生理活性作用の解析

胶原三肽在骨质疏松治疗中应用的生理活性分析

• 批准号: 16790858
• 负责人: 鶴岡 直樹
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790858/
• 关键词: コラーゲン; トリペプチド; オステリックス; 骨芽細胞; 骨粗鬆症; コラーゲン合成

これまでの研究で,コラーゲンの分解産物であるコラーゲントリペプチド(CTP)には,培養骨芽細胞のI型コラーゲン遺伝子の発現を転写レベルで増加させ,ラットの骨折治癒を促進する効果があることが明らかとなっている.本年度はさらにその作用機構の解明を目的として,CTPが培養骨芽細胞の遺伝子発現に与える影響をDNAアレイによって解析することとした.ヒト骨芽細胞株(hFOB1.19)の培養系にCTPを添加し,24h後に細胞を回収した.ここからtotal RNAを抽出してAffymetrixのヒト全ゲノム用のGeneChipによるDNAアレイ解析を行った.CTP添加群と非添加の対象群について各遺伝子の発現量を定量化し,CTP添加群で高い発現増加を示した転写因子を検索した.このうち最も高い増加率を示したのはオステリックスで,同タンパク質は骨芽細胞の成熟化に必須の骨特異的な転写因子として近年報告されていることがわかった.また同因子を強発現させるとコラーゲン遺伝子の発現量が顕著に増加することも報告されていることから,CTPによる発現変化をさらに詳しく解析した。CTP添加後の経時的なオステリックス遺伝子の発現をReal Time PCRによって定量化したところ,CTP添加後12h,24hで対象群と比較して2-3倍に増加した。またこれに追従する形で24h後以降にI型コラーゲン遺伝子の発現量が増加したことや,オステリックスによって発現が誘導されるとされている骨シアロタンパク質の発現増加も検出された.これによりCTPがオステリックスの発現を誘導し,その結果コラーゲンを含む骨特異的なタンパク質の発現が促進されると考えられた。一方,オステリックスを制御するとされている転写因子Runx2やその関連因子についてはCTPによる変化がなく,CTPからオステリックスの間には別の経路が存在すると考えられた.

In this study, the development of type I osteoblast in cultured bone bud cells was increased by the decomposition products of osteoblast, and the healing of osteoblast fractures was promoted. This year,CTP is aimed at clarifying the mechanism of action in cultured bone bud cells and its effects on DNA fragmentation. The culture system of bone bud cell line (hFOB1.19) was supplemented with CTP, and the cells were recovered after 24h. The total RNA was extracted from Affytrix's GeneChip and DNA analysis was performed. The expression of each gene in CTP added group and non-added target group was quantified. The expression of CTP added group increased significantly. The highest rate of increase in bone marrow cells was observed, and bone-specific factors necessary for bone bud cell maturation were reported in recent years. For example, if the number of entries in the list is greater than the number of entries in the list, the number of entries in the list will be greater than the number of entries in the list. After CTP was added, the expression of protein was quantified by Real Time PCR, and the number of samples increased by 2-3 times at 12h and 24h after CTP addition. After 24 hours of treatment, the amount of type I protein increased, and the amount of type I protein increased. This is the first time that CTP has been used to promote the development of a variety of products. On the one hand, the change of CTP is caused by the change of CTP, and the change of CTP is caused by the change of CTP, and the change of CTP is caused by the change of CTP.