内耳聴覚系の音刺激入力開始期における発達メカニズムの解析

声音刺激输入发作期内耳听觉系统发育机制分析

• 批准号: 16791034
• 负责人: 神谷 和作
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: 独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16791034/
• 关键词: 内耳科学; ホスファチジルイノシトール; 神経科学; 戻し交配; マウス; 聴性脳幹反応; 有毛細胞; 高音性難聴

我々は以前に行ったmRNA DD法にてPhosphatidylinositol-5kinase-1alpba(Pip5k1a)を聴覚の生後発達に関わる遺伝子として同定し、ホスファチジルイノシトール経路の聴覚発達おける重要性を示唆した。これに関連し、共同研究者である東京都臨床医学総合研究所、金保安則部長グループが新規に作成したPip5k1a遺伝子欠損マウスの供与を受け、聴覚機能および内耳構造に関する検索を行った。遺伝子タイピングはneo遺伝子およびターゲット遺伝子のPCRにより行い、これらの聴力レベルをABRにより評価し、Surface preparation法により有毛細胞の配列および感覚毛の形態を評価した。同マウスヘテロ接合体(+/-)の雌雄より交配を開始した。これらは遺伝的に聴覚障害を持つ129SvJ、C57BL/6をバックグラウンド系統に持っているため、正常聴力を持つなC3H/He系への戻し交配を行った。初代の-/-は、聴性脳幹反応(ABR)閾値において+/+との大きな差は見られなかった。しかし、二代目の-/-の約半数に40kHzの高音域のみで30db以上の聴力低下が見られるマウスが出現した。8kHzおよび20kHzでは正常なABR閾値を示した。高音域のみに障害を持つこれらの難聴マウスは内有毛細胞および外有毛細胞にしばしば異常配列が見られる傾向があった。この難聴マウス同士の交配ではほぼ全ての個体にて難聴の表現型が見られ、遺伝的原因による難聴である可能性が高い。これらの形質は全ての-/-に現れるわけではないため他の遺伝子の変異が関与している可能性も考えられる。現在、聴力レベルによりマウスを選別し、系統化している。C3H/He系への戻し交配は3代目まで得られ、現在4代目を作成している。今後外有毛細胞を中心とした機能解析および組織学的解析をより詳細に行う予定である。

We have demonstrated the importance of the previously performed mRNA DD method for Phosphatidylinositol-5kinase-1alpba(Pip 5k1a) in the development of postnatal development. Related, co-investigator, Tokyo Institute of Clinical Medicine, Minister of Security Kim, New Regulations, Pip 5k1a, Loss of Power, Function, and Inner Ear Structure The method of Surface preparation is used to evaluate the arrangement of hairy cells and the morphology of hair. The male and female hybrids (+/-) started mating. The C3H/He system was developed with the help of 129SvJ, C57BL/6 and the C3H/He system was developed with the help of normal force. The initial generation of-/-,(ABR) threshold value is +/+ About half of the-/-of the second-generation program is 40kHz, and the high-frequency range is more than 30db. 8kHz to 20kHz is the normal ABR threshold. The high frequency range of hair loss is difficult to detect, but the inner hair cells and outer hair cells have a tendency to be abnormal. It is difficult to mate with the same person, but the phenotype of the individual is difficult to see, and the cause of the inheritance is difficult to see. The nature of this matter is completely different from that of the other. Now, try to identify and systematize the problem. C3H/He hybrid was successfully bred in the third generation, but now it is produced in the fourth generation. In the future, the functional analysis and histological analysis of outer hair cells will be carried out in detail and determined.