非アルコール性脂肪性肝疾患の治療に資するホスホリパーゼCの解明

阐明有助于治疗非酒精性脂肪肝的磷脂酶 C

• 批准号: 21K19327
• 负责人: 河野 望
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19327/
• 关键词: ホスホリパーゼC; ホスファチジルイノシトール; 非アルコール性脂肪性肝疾患

LPIAT1を欠損したHuh-7細胞は、LPIAT1欠損マウス肝臓と同様にアラキドン酸含有PI の減少とオレイン酸含有PI の増加、中性脂質の蓄積がみられる。この細胞に[14C]グリセロールを添加し、[14C]ラベルされたPI の分解を経時的に調べると、LPIAT1 KO 細胞では野生型に比べてPI の分解が顕著に亢進した。このLPIAT1欠損によるPI分解の亢進はマウス肝臓においてもみられ、分解産物の追跡から、PLC様の酵素が働いていることが示唆されている。本年度は細胞レベルでのPI 分解アッセイを利用して、各種阻害剤を添加し、PI分解を抑制する化合物をスクリーニングした。その結果、PLCの一般的な阻害剤であるU73122やリソソームの酸性化を抑制するクロロキンではLPIAT1 KO 細胞におけるPI分解の亢進を抑制できなかった。一方で、脂質のホスファターゼを抑制する阻害剤の1つがLPIAT1 KO 細胞におけるPI分解の亢進を抑制することを見出した。またLPIAT1 KO 細胞におけるPI分解の亢進において、分解されるPIに分子種特異性があるか調べるために、d8グリセロールラベルによる標識PIのLC-MSでの検出系を検討した。d8グリセロールの添加条件、LC条件、MRM条件を決定し、48時間のd8グリセロールラベルで10-15%のPIをラベルし、それらの逆相カラムを用いたLC-MS/MSにより個々に検出・定量することに成功した。

LPIAT1 has a low concentration of Huh-7, LPIAT1 has a low concentration of PI, and LPIAT1 has a low concentration of PI and neutral fat. [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], [14C], and [14C]. LPIAT1 deficiency, PI decomposition, hyperactivity, liver, liver, liver and liver. This year, the cell cycle PI decomposition assay showed that the use of carbon dioxide, the addition of various hindrance compounds, and PI decomposition to inhibit the production of malondialdehyde compounds. The results showed that the general inhibition effect of PLC was U73122, the acidification of PI, the inhibition of LPIAT1 KO cell, the increase of PI decomposition, and the inhibition of PI decomposition. On the other hand, there is no significant difference between the two groups in terms of inhibition, inhibition, LPIAT1 KO, PI decomposition, inhibition, inhibition, inhibition and inhibition. The LPIAT1 KO cell, the PI decomposition unit, the PI molecule, the PI cell, the LC-MS cell, the PI cell, the cell, the LC-MS. D8 to add conditions, LC conditions, MRM conditions to determine, 48 days later, 10-15% PI conditions, reverse phase analysis to verify the success of the quantitative test by using two different LC-MS/MS conditions.

项目成果

イノシトール欠乏によるIre1活性化におけるVps34の機能解明

阐明 Vps34 在肌醇缺乏引起的 Ire1 激活中的功能

• 发表时间: 2023
• 作者: 岩田 紬;山岸 洸太;張 琇ウェン;八代田英樹;村田茂穂;新井 洋由;河野 望;青木 淳賢
• 通讯作者: 青木 淳賢

超臨界流体クロマトグラフィー質量分析を用いた重水素標識ホスホイノシチドの分析

使用超临界流体色谱-质谱法分析氘标记的磷酸肌醇

• 发表时间: 2022
• 作者: 岩田紬;石野雄己;倪申ウェイ;河野望;青木淳賢
• 通讯作者: 青木淳賢

胎児期大脳皮質形成過程におけるアラキドン酸含有ホスファチジルイノシトールの役割

含花生四烯酸的磷脂酰肌醇在胎儿大脑皮层形成过程中的作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 石野 雄己; 河野 望; 桑山 尚大; 川口 大地; 岸 雄介; 後藤 由季子; 新井 洋由; 青木 淳賢
• 通讯作者: 青木 淳賢

飽和脂肪酸によって小胞体ストレス応答が起きる分子メカニズムの解明

阐明饱和脂肪酸诱导内质网应激反应的分子机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 倪申ウェイ;葛西峻輔;赤木聡介;青木淳賢;新井洋由;河野望
• 通讯作者: 河野望

酸化リン脂質を介する生理活性脂肪酸の産生機構とその意義

氧化磷脂生产生理活性脂肪酸的机制及其意义

• 发表时间: 2022
• 作者: 八木優太朗;川名裕己;可野邦行;河野望;田辺弘明;岩部-岡田美紀; 岩部真人;山内敏正;門脇孝;横山茂之;青木淳賢;河野 望
• 通讯作者: 河野 望