チラコイド膜局在性イミュノフィリンおよび相互作用するタンパク質の生理機能の解明

阐明类囊体膜定位亲免蛋白和相互作用蛋白的生理功能

• 批准号: 05F05449
• 负责人: 久堀 徹
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05F05449/
• 关键词: イミュノフィリン; 葉緑体; TAPタグ; 蛋白質間相互作用

本研究では、葉緑体チラコイド膜ルーメンに存在するイミュノフィリンの生化学的な性質および生理学的な重要性を明らかにすることを目指している。特に、イミュノフィリン蛋白質が相互作用する相手の同定を研究目的の一つにおいており、本年度は、下記のような研究を実施した。(1)葉緑体に局在するイミュノフィリンのうち、12種類のFKBPについて発現系を構築した。(2)これらのプラスミドで大腸菌を形質転換し、可溶性の蛋白質を得て、10種類については、特異抗体の作成ができた。(3)新たに作成した抗体を用いて、野生型および変異イミュノフィリンで形質転換したシロイヌナズナについてチラコイド膜タンパク質の分析を行った。その結果、FKBP16-1がLHCIIと共局在すること、16-2,19がPSIと共局在すること、16-4,18がPSIIと共局在することを明らかにした。(4)タンデムアフィニティー精製用タグをもった5種類の葉緑体イミュノフィリンの発現系を構築し、シロイヌナズナの形質転換を行ったが、結果はまだ得られていない。

This study demonstrates the importance of the biochemical properties and physiology of chloroplast membrane proteins. This year's study was carried out with the aim of identifying the interaction between proteins. (1)The chloroplast development system was constructed for 12 species of FKBP. (2)This includes the identification of Escherichia coli, the identification of soluble proteins, the identification of 10 species, and the production of specific antibodies. (3)The new antibody is used for qualitative analysis of wild-type and mutant proteins. FKBP16-1, LHCII, PSI 16- 4, PSII 19, PSII 16- 4, PSII 18, PSII 16- 4, PSII 16- 4, PSII 16, PSII 16, PS (4)5 kinds of chloroplast development system were constructed, and the shape and quality of chloroplast were changed.