植物細胞個別化と酸化還元状態リアルタイム可視化

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(1)光微細加工技術を利用した細胞檻の作製顕微鏡の観察用ガラス基板表面に高さ50μm,格子幅20-50μmの檻を光微細加工技術を用いて作製した。特に、細胞のトラップ効率を高めるため、格子形状を柱ではなく衝立型にしたものが、効率よく細胞をトラップできることがわかった。(2)植物細胞内の小器官のレドックス状態のリアルタイムの可視化酸化還元応答GFPを植物内オルガネラへの移行シグナルを接続し、葉緑体、ミトコンドリア、細胞質に発現できるような形質転換植物の根組織からプロトプラストを調製し、光微細加工で作成した格子付きガラスを用いて顕微鏡観察を行った。還元剤、酸化剤による細胞内の変化を確認後、植物細胞に用いられるエリシターとしてジャスモン酸およびサリチル酸による細胞内の酸化還元状態の変化を確認した。特に、サリチル酸によって特異的に細胞内が酸化されること、その効果が一過的であること、ミトコンドリアに比べ細胞質が素早く酸化されることなどの結果を得た。(3)大型植物細胞膜の水輸送能(田中)昨年度に引き続き、ユリ緑葉から調製した大型プロトプラストを細胞檻で固定し、外液交換によって細胞サイズの変化を指標として細胞の水輸送能を測定した。