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網膜層形成における細胞体移動を制御する遺伝子のスクリーニング

筛选视网膜层形成过程中控制细胞体迁移的基因

基本信息

批准号：
05J02338
负责人：
曽根正光
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J02338/
关键词：
noncoding RNA nuclear domain nuclear matrix in situ hybridization RNA export nervous system knockout mouse splicing in sutu hybridazation RNA metabolizm 網膜細胞移動核内構造層形成核外輸送

项目摘要

網膜の層形成期には、最終分裂を終えた神経細胞は移動を開始し、特定の細胞層に位置するようになる。このような細胞タイプに特異的な振る舞いを制御する遺伝子を同定するため、網膜の2つの細胞タイプである、神経節細胞と光受容細胞に着目し、まず、両者で異なって発現する遺伝子を得ることに当たった。そして、これまでに両細胞タイプの一方にのみ発現する遺伝子を11同定した。神経節細胞に特異的に発現する遺伝子として同定されたものの一つは、全長8.7kbにわたってタンパク質の読み枠を持たないmRNA様noncoding RNAであり、それがドット状の核内ドメインを形成していることから、Gomafuと命名した。一般的なmRNAが転写後すぐに細胞質へと搬出され、ほとんど核に局在しないことを考えると非常に興味深い性質であると言える。本年度は、Gomafuを強制発現させた培養細胞を用いて、そのようなユニークな核局在のメカニズムの解明を試みた。その結果、スプライシング因子であるSF3b複合体を標的とした薬剤であるスプライソスタチンAを作用させるとGomafu RNAが一部核外移行することが明らかになった。今後、RNA干渉法を用いてSF3b複合体に関連する遺伝子を機能阻害することで、Gomafu RNAの核局在の分子機構を明らかにすることができると期待される。さらに、Gomafu遺伝子を完全欠損させたノックアウトマウスを用い、マイクロアレイ解析や標準組織染色によりGomafuが遺伝子発現の制御や組織形成に関わる可能性について検証した。残念ながら、そうした解析によってぐ通常の環境下ではノックアウトマウスにおいて野生型と比べて顕著な差を見出すことが出来なかった。しかしながらストレス環境下でGomafuが機能を果たす可能性は十分に考えられ、今後の検証に値する。

The stage of formation of the omentum layer, the end of the final division, the beginning of movement of the cells, and the position of the specific cell layer.このようなcell タイプにSpecial な Vibrant dance いをcontrol する伝子を同定するため、Omentum の2つのcell タイプである, 神経gangan cells and light-receptive cells に目し, まず, 両人でdifferentなって発 appear する伝子をget ることに为たった.そして, これまでに両cell タイプの Party にのみ発 appear する伝子を11同定した. The special に発成する缝子として同定されたものの一つは, total length 8. 7kbにわたってタンパク性の読み枠をholdたないmRNA様noncoding RNA であり, それがドット-shaped の内ドメインを Formation していることから, Gomafu とnaming した. Generally speaking, the mRNA is written in the cytoplasm and moved out of the nucleus. The game is very interesting and the character is very interesting. This year, Gomafu is forced to use いて and そのようなユニークなnuclear bureau in のメカニズムの解明みた.そのRESULTS, スプライシング Factor であるSF3b Complex をOBJECT としGomafu Part of RNA migrates outside the nucleus. From now on, the RNA interference method will use the SF3b complex-linked SF3b complex function-blocking SF3b complex, Gomafu The molecular mechanism of the RNA Nuclear Agency is clear and it is expected to be the same.さらに、Gomafu 伝子を completely lacks させたノックアウトマウスを用い、マイクロアレイanalyticやThe standard tissue staining method is Gomafu, and the possibility of tissue formation and the possibility of tissue formation are the same. Cannian Nako, Nakoana and Nakoana in the normal environment.マウスにおいてWild-type と than べて顕在なdifferent を见出すことが出なかった. The function of Gomafu in the environment is very likely, and the possibility is very high, and the future proof is very good.