温度感受性受容体に働く食品成分の探索とエネルギー代謝の作用の解析

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(1)コショウ中のTRPV1活性化成分:コショウの辛味成分piperineはTRPV1のアゴニストであることは知られている。昨年度までに、コショウのpiperineを含まない抽出画分に比較的強いTRPV1活性を確認した。そこで、これら活性成分の単離・同定を試みた。そして、既知化合物のpiperoleinA、piperoleinB、retrofractamideA,dehydropipernonalineをTRPV1活性成分として初めて同定した。これらの化合物のEC_<50>はpiperineよりも約10倍高濃度であった。(2)TRPA1発現細胞の構築とTRPA1に作用する食品成分の探索:Human TRPA1 cDNAをサブクローニングし、これをT-REx CHO細胞(invitrogene)に安定発現させた。このhTRPA1発現CHO細胞は、既知のTRPA1活性成分であるallyl isothiocyanate(AITC)に対して細胞内のCa^<2+>を上昇させることを確認した。この細胞を用いて、ニンニクやミョウガ成分のTRPA1活性を測定した。興味深いことに、ミョウガ成分Xとその類縁体3種は強くTRPA1を活性化させ、これまで最も強い食品由来のTRPA1アゴニストとして知られるAITCの約10分の1の濃度のEC_<50>であった。以上の結果は現在投稿中である。(3)TRPA1アゴニストのcinnamaldehydeの体脂肪蓄積抑制効果:TRPA1アゴニスト(AITC orcinnamaldehyde(CNA))を麻酔下ラットの血中に投与すると、副腎からのアドレナリン分泌が促進されることを昨年度見出した。そこで、in vivoにおけるTRPA1アゴニストのエネルギー代謝亢進効果を確認するために、CNA摂取におけるマウス体脂肪蓄積抑制効果を検討した。CNAを0、0.1、0.5、1%添加した高脂肪高ショ糖食をC57BL/6マウスにペアーフィディングし、1ケ月間飼育した。0.1%以上のCNA添加群において、無添加群よりも有意な腸間膜脂肪組織の蓄積が抑制された。また、腎周囲、精巣上体白色脂肪組織重量もCNAの添加濃度依存的に蓄積が抑制された。以上より、長期間のCNA摂取はエネルギー代謝を亢進させ、体脂肪の蓄積を抑制することが示唆された。以上、今年度の研究により、新たなTRPV1及びA1活性食品成分を同定した。また、TRPA1アゴニストにおける体脂肪蓄積抑制効果をマウスで確認した。