環境化学物質によるTRPA1チャネル活性化の分子機構解明

阐明环境化学物质激活TRPA1通道的分子机制

• 批准号: 22K10515
• 负责人: 香川 聡子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Yokohama College of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10515/
• 关键词: ヒトTRPA1; 環境化学物質

本研究は、環境化学物質による侵害刺激受容体・TRPA1活性化の分子機構解明を目的として、in vitro 実験によるTRPA1活性化の定量的解析結果とドッキングシミュレーションによって得られるドッキングスコアによるin silico 評価結果を合わせて解析することにより、TRPA1に親和性の高い化学物質の特徴と、TRPA1分子の標的部位を抽出することを目的とする。本年度は、化粧品や家庭用品などに広く使用されているイソチアゾリノン系抗菌剤を対象とした。in vitro評価としてヒトTRPA1を恒常的に発現するFlp-In 293細胞株を用いて、細胞内へのカルシウムイオンの流入を指標にイオンチャネル活性化を定量的に解析した。in silico 評価としては、Protein Data BankよりヒトTRPA1の立体構造モデル（PDB ID:6X2J, 6PQO）をダウンロードし、Molecular Operating Environment（MOE 2022.02,MOLSIS Inc.）を用いて、構造最適化後にドッキングシミュレーションを行い、ヒトTRPA1とイソチアゾリノン系抗菌薬の分子間で相互作用する部位の探索を行った。in vitro評価結果では、今回評価対象とした5種イソチアゾリノン系抗菌薬は、いずれもヒトTRPA1を活性化することが判明した。in silico 評価結果では、評価した5種イソチアゾリノン系抗菌薬がヒトTRPA1の非共有結合性アゴニストの結合部位であることが指摘されているTyr840、Glu864、Ser887、Gln940のいずれか、あるいは複数の部位と相互作用する可能性が示された。特に最もEC50値が低い2Cl-OITについては、共有結合性アゴニストの結合部位であるCys621を修飾する可能性も示された。

This study aimed to elucidate the molecular mechanism of TRPA1 activation, a receptor for environmental chemicals, and to characterize TRPA1 high affinity chemicals. TRPA1 target site extraction This year, the use of cosmetics and household products in the field of anti-microbial agents In vitro evaluation, TRPA1 was found to be constant, Flp-In 293 cell line was used, and the intracellular cell flow and inflow index were analyzed quantitatively. Protein Data Bank (PDB ID:6X2J, 6PQO), Molecular Operating Environment (MOE 2022.02, MOLSIS Inc.) To explore the molecular interaction sites of TRPA1 and TRPA2 antibacterial agents after optimization of structure and application. The results of vitro evaluation showed that 5 kinds of anti-bacterial agents were active in TRPA1. In silico evaluation results, five kinds of antibacterials were evaluated. The non-consensus binding sites of TRPA1 were identified. Tyr840, Glu864, Ser887, Gln940 were identified. The possibility of interaction between multiple sites was also shown. In particular, the lowest EC50 value is 2Cl-OIT, and the possibility of modification of the binding site by Cys621 is indicated.

项目成果

Isothiazolinone系抗菌薬によるヒトTRPA1活性化のin silico分子機構解析

异噻唑啉酮类抗生素激活人 TRPA1 的计算机分子机制分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Kumara De Silva Yakdehige Sanath;Rajagopalan Uma Maheswari;Li Danyang;Kadono Hirofumi;中向井 璃奈，浦島 桃香，森 葉子，礒部 隆史，大河原 晋，河村 伊久雄，三浦 伸彦，北川 康行，埴岡 伸光，神野 透人，香川（田中） 聡子
• 通讯作者: 中向井 璃奈，浦島 桃香，森 葉子，礒部 隆史，大河原 晋，河村 伊久雄，三浦 伸彦，北川 康行，埴岡 伸光，神野 透人，香川（田中） 聡子

2-Ethyl-1-hexanol、TexanolおよびTXIBによる侵害刺激の種差に関する研究

2-乙基-1-己醇、Texanol和TXIB毒性刺激的物种差异研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 森 葉子;香川（田中）聡子;田原 麻衣子;河上 強志;青木 明;岡本 誉士典;礒部 隆史;大河原 晋; 埴岡 伸光;東 賢一;酒井 信夫;神野透人
• 通讯作者: 神野透人

in vitro 及びin silico手法を用いるisothiazolinone系抗菌薬によるTRPV1活性化評価

使用体外和计算机方法评估异噻唑啉酮抗生素对 TRPV1 的激活

• 发表时间: 2023
• 作者: 宮崎悠里奈;大河原晋;河村伊久雄;三浦伸彦;森葉子;磯部隆史;埴岡伸光;神野透人;香川（田中）聡子
• 通讯作者: 香川（田中）聡子

Species-Specific Activation of Transient Receptor Potential Ankyrin 1 by Phthalic Acid Monoesters

邻苯二甲酸单酯对瞬时受体电位锚蛋白 1 的物种特异性激活

• DOI: 10.1248/bpb.b22-00645
• 发表时间: 2022
• 期刊: Biological and Pharmaceutical Bulletin
• 影响因子: 2
• 作者: Mori Y;Aoki A;Okamoto Y;Isobe T;Ohkawara S;Hanioka N;Tanaka-Kagawa T;Jinno H.
• 通讯作者: Jinno H.