リンパ管内皮細胞のToll様受容体を介したケモカイン・白血球接着因子の発現誘導

通过淋巴内皮细胞中的 Toll 样受体诱导趋化因子和白细胞粘附因子表达

• 批准号: 05J08987
• 负责人: 黒嶋 伸一郎
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J08987/
• 关键词: Toll-like receptor; TLR2; TLR4; ケモカイン; CCL21; 口腔組織; 粘膜免疫; リンパ管内皮細胞

当該研究室における研究から、ヒト小腸毛細リンパ管は、Toll-like receptor(TLR)2および4、ならびにcys-cys chemokine ligand(CCL)21を同時発現すること、また、ヒト歯肉におけるリンパ管はTLR2および4を発現せず、CCL21のみを発現することを明らかにした。我々はこの相違点の要因を明らかにすることを目的とし、以下の実験を行った。(1)種々の口腔組織(ヒト舌、頬粘膜、歯髄、口蓋扁桃)を用い、リンパ管内皮細胞におけるTLR2、TLR4およびCCL21の発現を免疫組織化学的に検索(なお、組織にはそれぞれ健常および炎症組織を用いた。)した。(2)培養ヒト成人皮膚真皮由来リンパ管内皮細胞(AD-HDLEC)および培養ヒト新生児皮膚真皮由来リンパ管内皮細胞(NEO-HDLEC)におけるTLR2、TLR4、MD-2(TLR4と複合体を形成する分子)、ならびにCCL21の発現と、TLR2およびTLR4によるCCL21発現誘導を、RT-PCR、ウェスタンブロッティング、免疫染色、ルシフェラーゼアッセイ、ならびに抗体阻害実験を用いて検索した。その結果、(1)ヒト健常および炎症口腔組織における全てのリンパ管はTLR2およびTLR4を発現しなかった。(2)ヒト健常組織において、歯髄では集合リンパ管のみがCCL21を発現し、毛細リンパ管はCCL21を発現しなかった。また、舌、頬粘膜ならびに口蓋扁桃ではほぼ全てのリンパ管がCCL21を発現した。(3)ヒト炎症組織において、歯髄、舌、ならびに頬粘膜では全てのリンパ管がCCL21を発現せず、口蓋扁桃では全てのリンパ管がCCL21を発現した。(4)NEO-HDLECにおいて、TLR2、TLR4、およびMD-2は遺伝子レベルのみ発現が認められ、タンパク発現は認められなかった。一方AD-HDLECにおいてTLR2、TLR4、およびMD-2は遺伝子およびタンパクレベルで発現が認められた。また、遺伝子レベルではAD-HDLECがNEO-HDLECと比較して優位にTLR2、TLR4、およびMD-2を発現した。(5)NEO-HDLECおよびAD-HDLECは遺伝子およびタンパクレベルでCCL21を発現した。(6)TLR2およびTLR4によるCCL21の発現誘導に関しては現在も検索中である。なお、上記の検索ではリンパ管特異的マーカー(血管内皮細胞では発現しない)であるdesmoplakin、lymphatic endothelium hyaluronan receptor、PodoplaninならびにProx1に対する特異抗体を用いて組織内のリンパ管を同定した。

When the laboratory における studied ら, ヒト small intestinal capillaries リ <e:1> パ tubules, Toll-like receptor(TLR)2および4, ならびにcys-cys chemokine Ligand (CCL) 21 を 発 now at the same time す る こ と, ま た, ヒ ト 歯 meat に お け る リ ン パ tube は TLR2 お よ び 4 を 発 now せ ず, CCL21 の み を 発 now す る こ と を Ming ら か に し た. I 々, 々, を, とを, which are in conflict with the purpose of を, ら, にする, とを, と and と. The following is an actual experience of を and った. (1) kind of 々 の oral tissue (ヒ ト tongue, 頬 mucous membrane, 歯 marrow, flap almond) を い, リ ン パ tube skin cells に お け る TLR2 and TLR4 お よ び CCL21 の 発 presently を immunohistochemical に 検 cable (な お, organization に は そ れ ぞ れ health often お よ び を inflammation tissue with い た.) Youdaoplaceholder0 た. (2) develop ヒ ト adult skin leather origin リ ン パ tube skin cells (AD - HDLEC) お よ び cultivate ヒ ト where new skin leather origin リ ン パ tube skin cells (NEO - HDLEC) に お け る TLR2 and TLR4, MD - 2 (TLR4 と complex を form す る), な ら び に CCL21 の 発 と, TL R2 お よ び TLR4 に よ る CCL21 発 now induced を, rt-pcr, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ, immune dyeing, ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ, な ら び に antibody resistance against be 験 を with い て 検 cable し た. そ の results, (1) ヒ ト health often お よ び oral tissue inflammation に お け る full て の リ ン パ tube は TLR2 お よ び TLR4 を 発 now し な か っ た. (2) ヒ ト health organizations often に お い て, 歯 marrow で は collection リ ン パ tube の み が CCL21 を 発 し, capillary リ ン パ tube は CCL21 を 発 now し な か っ た. ま た, tongue, 頬 mucosa な ら び に flap almond で は ほ ぼ full て の リ ン パ tube が CCL21 を 発 now し た. (3) ヒ ト inflammation tissue に お い て, 歯 marrow, tongue, な ら び に 頬 mucosa で は full て の リ ン パ tube が CCL21 を 発 now せ ず, flap almond で は full て の リ ン パ tube が CCL21 を 発 now し た. (4) the NEO - HDLEC に お い て, TLR2 and TLR4, お よ び MD - 2 は posthumous son 伝 レ ベ ル の み 発 が now recognize め ら れ, タ ン パ ク 発 は now recognize め ら れ な か っ た. One AD - HDLEC に お い て TLR2 and TLR4, お よ び MD - 2 は heritage 伝 son お よ び タ ン パ ク レ ベ ル で 発 が now recognize め ら れ た. ま た, but 伝 レ ベ ル で は AD - HDLEC が NEO - HDLEC と compare し て primacy に TLR2 and TLR4, お よ び MD - 2 を 発 now し た. (5)NEO-HDLECおよびAD-HDLEC 伝 offspring およびタ パ パ レベ で で で でCCL21を exhibit た た. (6) The occurrence of TLR2およびTLR4によるCCL21 is induced by に related to <s:1> て present in the である 検 cable である. な お, written の 検 cable で は リ ン パ tube specific マ ー カ ー (vascular endothelial cell で は 発 now し な い) で あ る desmoplakin, lymphatic endothelium hyaluronan Receptor and Podoplanin な ら び に Prox1 に す seaborne を る specific antibody with い て tissues の リ ン を パ tube with constant し た.

项目成果

ヒト歯髄リンパ管におけるcys-cys chemokine ligand 21の発現

人牙髓淋巴管中cys-cys趋化因子配体21的表达

• 发表时间: 2005
• 期刊: 北海道歯学雑誌 26(2)
• 作者: 黒嶋伸一郎;沢 禎彦;山岡雄司;井上農夫男;吉田重光
• 通讯作者: 吉田重光