成体型再生を可能とする成体イモリの脊髄再生における神経細胞新生の意義の検証

验证神经发生在成体蝾螈脊髓再生中的重要性，从而实现成体型再生

• 批准号: 22K06822
• 负责人: 北田 容章
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06822/
• 关键词: 脊髄損傷; 有尾両生類; 遺伝子組換え; 細胞運命追跡; 神経細胞新生; 神経再生; 再生生物学

本研究は、脊髄損傷後生じる自発的な構造的・機能的再建を果たすことの可能な有尾両生類である成体イモリを用い、成体イモリ脊髄再生における神経細胞新生の意義と、神経細胞新生を生じせしめる因子の同定、そして３次元的組織再構築を果たす由来細胞の特定を目指すものである。2022年度では、特に成体イモリ脊髄再生における神経細胞新生の意義に関する研究を行う予定となっていた。部位特異的遺伝子組換えによるspatiotemporalな遺伝子発現制御手法を応用し、ドライバーとして脊髄上衣細胞特異的ERT2CreERT2、レポーターとして神経細胞特異的loxP-mKate2-loxP-EGFPおよび神経細胞特異的loxP-mKate2-loxP-ジフテリア毒素Aをそれぞれトランスジェニックしたイモリを作成し、F2世代以降を得ている。これまでに、これらの動物を掛け合わせたダブルトランスジェニック動物を得、幼若個体における神経細胞におけるmKate2発現を確認と、タモキシフェン投与後の新生神経細胞におけるEGFP発現を確認した。このことは、幼若個体において脊髄上衣細胞が新生神経細胞の細胞ソースとして機能していることを示している。タモキシフェン投与後の脊髄損傷によりEGFP発現細胞が増加することから、損傷刺激が神経細胞新生のトリガーとなっていることが示唆されている。2022年度においては、申請時計画に先駆けて神経細胞新生を生じせしめる因子の同定についてもアプローチした。損傷２週間後に再生組織を採取しトランスクリプトーム解析を行うことで、発現亢進を見た30遺伝子を同定し、in situ hybridizationによりそれぞれの発現パターンを確認した。

In this study, the results of the reconstruction of self-made mechanisms in this study and spinal cord regeneration may have the meaning of tail biology, adult biology, spinal cord regeneration, cell regeneration, tissue regeneration, and tissue regeneration. In the year 2022, the adults and adults were born again and again. In the meaning of the birth of the baby, the study was scheduled to be carried out. The specific parts of the body are known as the control method, the control method, the ERT2CreERT2 of the top, the loxP-mKate2-loxP-EGFP of the cell, the loxP-mKate2-loxP- of the cell, the toxin A, the toxin A, the cell, the cell. If you are young and healthy, you will know that the mKate2 has been confirmed, and that the new baby has been registered and EGFP has been confirmed. If you are young, you will have a spinal coat, a new baby, a new baby, a cell, a cell, a cell In the back of the EGFP, there is an increase in the number of cells, and the stimulation is due to the birth of the baby. At the time of application and application for the year 2022, we plan to apply for the same number of factors as those for the birth of the baby. After 2 years of treatment, the regeneration tissue was analyzed and analyzed. The results showed that there was no significant difference between the two groups. After 2 weeks, the regeneration tissue was analyzed. The results showed that 30% of the samples were not affected, and the in situ hybridization was detected.

项目成果

イベリアトゲイモリの神経幹細胞培養法の確立

伊比利亚玩具神经干细胞培养方法的建立

• 发表时间: 2023
• 作者: 関亮平;林真一;大江総一;小池太郎;中野洋輔;平原幸恵;田中進;北田容章
• 通讯作者: 北田容章

イモリ中枢神経系に由来する幹細胞の培養法の確立

蝾螈中枢神经系统来源干细胞培养方法的建立

• 发表时间: 2023
• 作者: 関亮平;林真一;大江総一;小池太郎;中野洋輔;平原幸恵;田中進;北田容章
• 通讯作者: 北田容章

OLIG2 is an in vivo bookmarking transcription factor in the developing neural tube in mouse

OLIG2 是小鼠发育神经管中的体内书签转录因子

• DOI: 10.1111/jnc.15746
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Neurochemistry
• 影响因子: 4.7
• 作者: Hayashi Shinichi;Oe Souichi;Koike Taro;Seki‐Omura Ryohei;Nakano Yosuke;Hirahara Yukie;Tanaka Susumu;Ito Takeshi;Yasukochi Yoshiki;Higasa Koichiro;Kitada Masaaki
• 通讯作者: Kitada Masaaki

イベリアトゲイモリ中枢神経系由来の神経幹細胞の培養法

伊比利亚网纹动物中枢神经系统源性神经干细胞的培养方法

• 发表时间: 2023
• 作者: 関亮平;林真一;大江総一;小池太郎;中野洋輔;平原幸恵;田中進;北田容章
• 通讯作者: 北田容章

Establishment of neural stem cell culture from the central nervous system of the Iberian ribbed newt Pleurodeles waltl

• DOI: 10.1111/dgd.12820
• 发表时间: 2022-10
• 期刊: Development
• 影响因子: 4.6
• 作者: Ryohei Seki-Omura;S. Hayashi;Souichi Oe;T. Koike;Y. Nakano;Y. Hirahara;Susumu Tanaka;M. Kitada