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イトヨ雄特異タンパク(スピギン)を指標にした環境アンドロジェン評価法の開発

以刺鱼雄性特有蛋白（spigin）为指标的环境雄激素评价方法的开发

基本信息

批准号：
16710033
负责人：
長江真樹
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16710033/
关键词：
スピギンイトヨ環境アンドロジェンバイオマーカー

项目摘要

イトヨ(Gasterosteus aculeatus)は繁殖期に営巣するという特殊な生態を示す硬骨魚類であり、雄は巣を作る際に弾力性に富んだ不溶性の接着タンパクを合成および分泌することが古くから知られていた。近年、その接着タンパクが男性ホルモンの刺激によって腎臓で特異的に合成される「スピギン」という分子から成ることが明らかとなった。そこで本研究では、男性ホルモンによってその合成が強く支配されているこの「スピギン」分子に着目し、本分子をバイオマーカーに用いた男性ホルモン様作用評価システムの開発を行い、様々な化学物質の男性ホルモン様作用を明らかにすることを目的とする。昨年度、スピギン遺伝子のゲノム配列解析(エクソン-イントロン構造解析)を経て、スピギンmRNA量を測定可能なリアルタイムPCR測定系を確立した。本年度はまず、本測定系の感度と精度について検討した。イトヨ雌に10^1〜10^<-6>μg/Lの濃度でメチルテストステロンを一週間曝露し、腎臓のスピギンmRNA量を測定した。その結果、10^<-2>μg/L(10ppt)と極めて低濃度の曝露においても、そのホルモン作用をバイオマーカーの増加として検出可能であった。また、同一個体の測定値のばらつきも小さく、本測定系の精度が高いことも窺えた。抗アンドロゲン剤であるフルタミドを上述と同様の曝露試験に添加したところ、スピギンmRNA濃度の低下もしくは消失が認められたことから、本試験法は外因性物質の男性ホルモン作用および抗男性ホルモン作用の両方を検出可能であることが明らかとなった。本年度、実際の河川および河口域で採取した水試料を用いた曝露試験を予定していたが、イトヨ個体が入手できなかったため、実施を見送った。今後、化学物質による汚染が進行していると予想される河川の水試料を用いた曝露試験を早急に実施する予定である。

In the breeding season, the fish (Gasterosteus aculeatus) has special ecological characteristics. In the breeding season, the fish has special ecological characteristics. In the breeding season, the fish has special ecological characteristics. In the breeding season, the fish has special ecological characteristics. In the breeding season, the fish has special ecological characteristics. In recent years, there have been a number of changes in the structure of the brain, such as the development of the brain, the development of the brain, and the development of the brain. In this study, we evaluated the effects of male chemicals on the development and development of male chemicals, and found that the effects of male chemicals on the development and development of male chemicals were significantly different from those of male chemicals. The PCR assay system was established for the determination of mRNA levels and protein sequence analysis. This year, the sensitivity and accuracy of this measurement system are discussed. The concentration of estrogen was 10^1 ~ 10^<-6>μg/L, and the amount of estrogen mRNA was measured during the week. Results: 10^<-2>μg/L(10ppt) and extremely low concentrations of exposure, high concentrations of exposure. The accuracy of this measurement system is high. In addition to the above, a decrease in mRNA concentration was identified in the exposure test for anti-male substances and anti-male effects. This year, the river and estuary areas have been taken to determine the use of water samples. In the future, pollution from chemical substances will continue to occur, and water samples from rivers will be exposed to early detection.