新規アデノウイルスベクターによるヒト造血幹細胞への遺伝子導入の最適化

使用新型腺病毒载体优化基因转移至人类造血干细胞

• 批准号: 16790117
• 负责人: 櫻井 文教
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: 独立行政法人医薬基盤研究所 (2005)National Institute of Health Sciences (2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790117/
• 关键词: アデノウイルスベクター; 造血幹細胞; 遺伝子治療; CD34陽性細胞; アデノウイルス; 再生医療; プロモーター

まず本年度は、ヒト造血幹細胞を含む画分である骨髄由来CD34陽性細胞において最も高い転写活性を示したCAプロモーター(cytomegarovirus由来エンハンサーおよびβ-actinプロモーターにβ-actinのイントロンを加えたプロモーター)を搭載した35型アデノウイルス(Ad)ベクターを用いて検討を行った。CAプロモーターを搭載した35型Adベクターにより遺伝子発現を示したCD34陽性細胞が自己増殖能ならびに分化能を有しているかどうかについてcolony-formingアッセイを用いて検討したところ、遺伝子発現細胞は未処理細胞とほぼ同程度のコロニーを形成した。また遺伝子発現細胞においては、最も未分化な細胞由来のコロニーであるCFU-Mixコロニーの形成も観察された。従って35型ベクターは造血前駆細胞にも遺伝子導入可能であること、また遺伝子発現細胞は自己増殖能および分化能を有していることが明らかとなった。35型Adベクターを用いることでヒト造血幹細胞に対し高効率な遺伝子導入が可能になったことから、自己複製関連遺伝子を導入し、造血幹細胞の自己複製を試みた。自己複製関連遺伝子としては、HoxB4およびBmi1を選択した。ヒト骨髄由来CD34陽性細胞に対し、35型Adベクターを用いてこれらの遺伝子を導入したところ、有意な自己増殖促進は見られなかった。現在、これらの遺伝子の発現レベルを調製することにより自己増殖促進が観察されないかどうか検討するとともに、その他の自己複製関連遺伝子について検討中である。

The hematopoietic cells of the year and the hematopoietic cells of the year contain the following information: the origin of the CD34, the highest writing activity of the CD34, the highest writing activity of the CA (the origin of cytomegarovirus) shows that the hematopoietic cells of the year, the hematopoietic cells The results showed that the CD34 sex cells were able to differentiate and differentiate in the same degree as that of the CD34 cells. The results showed that the cells of the CD34 sex cells had the same degree of differentiation as those of the control group. The cause of the most undifferentiated cells and the most undifferentiated cells has been observed. The origin of the cells has been detected. The origin of the cells has been detected by the formation of CFU-Mix cells. The prehematopoietic prehematopoietic progenitor cells may have the ability to colonize and differentiate into the cells. Type 35 Advertising virus was used to copy hematopoietic cells and hematopoietic cells. The high incidence rate of hematopoietic cells was high. You can make a copy of this file by yourself, and select the Bmi1 file by copying it and HoxB4 it. The cause of the disease is CD34, and the type 35 Adjuvant is intended to promote the colonization of human beings with the help of their own colonization. Now, you can see that you don't need to be able to promote your own colonization. Now, you can make a copy of yourself.