エチレンセンサーたんぱく質ETR1における情報伝達機構の解明

阐明乙烯传感器蛋白ETR1的信息转导机制

• 批准号: 17770121
• 负责人: 菊地 晶裕
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17770121/
• 关键词: 情報伝達タンパク質; 2成分系情報伝達系; 植物ホルモン; エチレン; ETR1; 2成分情報伝達系

エチレンは植物の生理現象に深く関与する植物ホルモンである。近年、植物のエチレン受容体として2成分情報伝達系に属するETR1 familyが同定され、エチレン情報伝達に関する植物生理学的な研究が多く報告されている。しかしながら、エチレン濃度情報を伝達する機構は分子レベルとなると、ほとんど解明されていない。これは、ETR1が高等植物由来の膜タンパク質であり、かつ、銅イオンを必須とする金属タンパク質でもあることから、その発現系構築が極めて困難であることが要因である。そこで、本研究では、X線吸収スペクトルなどの各種分光法や立体構造解析に供すことができる量のETR1タンパク質を得ることが可能となるような大量発現系構築を目的とした。平成17年度からメタノール資源化性酵母P.pastorisを利用した大量発現系構築に着手し、さらに本年度はETR1 familyに属するERS1の発現系構築も試みた。いずれの場合にも、プロトコールどおりの手法では転換効率や再現性が悪く、安定した形質転換体が得られなかったため、エレクトロボレーターを用いることで転換効率の改善を行った。ETR1/ERS1タンパク質の発現を確認する第一のステップであるウェスタンブロッティングの結果から、現時点ではETR1やERS1タンパク質の発現確認に至っていない。Gタンパク共役型受容体(GPCR)の場合、P.pastorisの変異株を用いることで大量発現系構築に成功した例が報告されているため、本研究でも期待の持てる変異株だと考えられる。この株を入手する手続きを行ったが、Material Transfer Agreement(MTA)の締結の関係から年度内に入手することはできなかった。

The physiological phenomena of plants are closely related to those of plants. In recent years, there have been many reports on plant physiology related to the identification and identification of plant receptors and their two component information systems. The information on the concentration is transmitted to the organization. ETR1 is a membrane derived from higher plants. It is very difficult to construct a metal membrane derived from higher plants. The purpose of this study is to analyze the three-dimensional structure of X-ray absorption and X-ray absorption, and to obtain the quality of ETR. In 2017, we started to construct a large-scale development system using resourceful yeast P. pastoris, and this year we tried to construct an ERS1 development system belonging to the ETR1 family. In this case, the method of conversion efficiency and reproducibility are improved, and the quality of conversion is improved. ETR1/ERS1 quality occurrence confirmation, the first point of view, the current point of view, ETR1/ERS1 quality occurrence confirmation, etc. In the case of GPCR, P. pastoris was successfully constructed in a large number of cases. This study is expected to continue. The relationship between the company and the Material Transfer Agreement(MTA) was established during the year.