リンパ管におけるホメオボックス転写因子Proxlの機能解析

淋巴管同源框转录因子Proxl的功能分析

• 批准号: 17790255
• 负责人: 市瀬 多恵子
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790255/
• 关键词: リンパ管; マウス; Proxl; Prox1

Proxlの発現誘導が可能な遺伝子導入マウス(CGPマウス)とCAG-Creマウスを交配し、Prox-1の全身性発現の影響について解析したところ、ダブルトランスジェニックマウス(dTgマウス)は、胎生11.5日までには死亡するが、PECAM-1抗体を用いたホールマウント免疫染色の結果では、血管形成に顕著な異常は見られなかった。また、CGPマウスとTie2-Creマウスを交配し、血管内皮でのProx-1の強制発現の影響について解析したところ、dTgマウスは、メンデルの法則から予想される数より少ないものの、出生し、8週齢までに死亡することが分かった。出生後1日目のCGP/Tie2-Cre dTgマウスの小腸を、PECAM1およびLYVE1に対する抗体を用いて免疫染色を行ったが、血管・リンパ管の形成に顕著な異常は見られなかった。本研究では、Proxlが、血管内皮細胞からリンパ管内皮細胞への分化を一意的に決定するわけではないことが示唆されたが、致死の原因や機序は不明であり、更なる解析の必要性が考えられた。一方、変異型SV40 large T抗原を内皮細胞で発現する遺伝子導入マウスから、成体の内皮細胞を効率良く分離、培養可能であることが所属研究室において示されていたことから、当該マウスを用いた胎生期の内皮細胞の分離、培養を試みた。その結果、PECAM-1・VEGFR-2陽性、Lyve-1陰性の血管内皮細胞と、PECAM-1・Lyve-1・Proxl陽生のリンパ管内皮細胞の分離、培養に成功した。CGPマウスと組み合わせることで、Proxlを過剰発現する胎生期血管内皮の性質をin vitroで解析するために有効であると考えられた。

Proxl expression induction may be induced by gene introduction (CGP) and CAG-Cre expression, and the effects of Prox-1 on systemic expression may be analyzed. The results of immunostaining with PECAM-1 antibody may be abnormal in angiogenesis. CGP, Tie2-Cre, CGP, Tie2-Cre, Tie 2-Cre, Tie 2, Tie 2-Cre, Tie 2, Tie 2, Tie CGP/Tie2-Cre dTg is present in the small intestine, PECAM1 and LYVE1. Immunostaining is used to detect abnormal blood vessels. In this study, we investigated the necessity of analyzing the mechanism of vascular endothelial cell differentiation. The expression of SV40 large T antigen in endothelial cells was detected by gene transfection, and the isolation and culture of adult endothelial cells were performed successfully. PECAM-1·Lyve-1·Proxl-positive vascular endothelial cells were isolated and cultured successfully. CGP is a family of vascular endothelial cells.