遺伝子改変技術を用いたVEGFR-3の機能解析

利用基因修饰技术对VEGFR-3进行功能分析

• 批准号: 02J07230
• 负责人: 市瀬 多恵子
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J07230/
• 关键词: リンパ管; VEGFR-3; Prox1; マウス

本研究では、内皮細胞におけるProx1の発現を人為的に制御することでProx1の生体における機能を解析することを目的として、2種類のトランスジェニックマウスの作成を進めた。1つは、独自にクローン化したVEGFR-3転写制御領域に、Creリコンビナーゼを接続したトランスジーンである(R3-Cre)。もう一つは、CAG promoter-loxP-GFP(または、βgeo)-pA signal-loxP-Prox1 cDNA-pA signalという構造からなるトランスジーン(CFPまたはCGP)で、Creリコンビナーゼによる切り出しが起きると、それまで発現していたGFP(lacZ)の発現が消失し、下流のProx1 cDNAが発現する。交配により、これら2種のトランスジーンを持つマウスを作成し、内皮でProx1を強発現するマウスを得ることが出来る。R3-CreマウスとROSA26Rマウスとの交配により得られた産仔において、X-gal染色を行ったところ、10系列のうち4系列において、内皮におけるlacZの発現が確認された。作成した3系列のCFPマウスのうち、GFPの蛍光により全身性の発現が期待された1系列を、内皮および心臓でCreを発現するR3-Creマウスと交配した。2種のトランスジーンを持つマウスでは、心臓におけるGFPシグナルの消失およびProx1の発現誘導は確認されたが、内皮におけるProx1の発現誘導は確認出来なかった。GFPの蛍光により全身性の発現が期待されたCFPマウスであるが、内皮細胞におけるトランスジーンの発現が、無い、もしくは十分でないことが予想された。血管およびリンパ管内皮でCGPトランスジーンを強く発現するマウスを作出する必要性がある。

This study aims to analyze the biological function of Prox1 in vitro and in vivo. 1. Write Control Domain, Cre, C CAG promoter-loxP-GFP(βgeo)-pA signal-loxP-Prox1 cDNA-pA signal was constructed and the protein expression (CFP) was detected. GFP(lacZ) was detected and the downstream Prox1 cDNA was detected. Mating, breeding, breeding R3-Cre, ROSA, 26R, 26 R, 26 R 26 R, 26 R 26 R The CFP, GFP and Cre of the 3 series are expected to be present throughout the body, and the Cre of the 1 series is expected to be present throughout the body. 2 kinds of GFP gene expression are detected in the heart, the GFP gene expression is detected in the heart, and the Prox1 gene expression is detected in the endothelium. GFP is expected to be produced systemically, and endothelial cells are expected to be produced systemically. It is necessary to strengthen the development of vascular endothelial cells.