石灰小体はエキノコックスの発育にどのように係わるのか?

钙质体如何参与棘球绦虫的发育？

• 批准号: 17790275
• 负责人: 長内 理大
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790275/
• 关键词: エキノコックス; 寄生虫; 分子生物学; 石灰小体; カルシウム

石灰小体はエキノコックスの発育に必須であるがその機能は不明であり本研究では生化学・分子生物学的に機能を解明することを目的とした。本年度は前年度明らかにした石灰小体に特徴的に大量に存在するたんぱく質についてアミノ酸配列の解析結果をもとにデータベースなどを用いて遺伝子のクローニングを試みた。明らかにしたタンパク質のうち特に発現量の多い16kDa、10kDa、8kDaのタンパク質はいずれも相同遺伝子が単包虫のみで報告されていた。報告の配列をもとにPCRによって部分配列のcDNAを単離した。今後これらのタンパク質の大量発現などにより機能の解析・抗体の作製などが行われると期待できる。次に本年度はNativeなタンパク質の機能を解析することを目的とし、これまでトリクロロ酢酸やアミド硫酸などにより変性条件でしか抽出できなかった石灰小体タンパク質について穏やかな抽出条件を検討した。その結果Tween20やサルコシルによってもタンパク質が抽出され抽出効率もTCAと同程度であった。今後、この抽出されたタンパク質を用いて生理的な機能の解明を行う。さらに、石灰小体は宿主の免疫系に影響を与える可能性が報告されていることから、本年度はまず、石灰小体抽出タンパク質の抗原性について検討した。感染マウスから血清を時系列で採取し前述の方法で抽出したタンパク質を用いてウェスタンブロッティングにより解析した。その結果、石灰小体のみに存在する50kDaのタンパク質が感染1ヵ月後からバンドとして検出された。これは、石灰小体に存在するタンパク質が抗原性を持っている可能性を示唆するものであり、石灰小体の生理的な機能とも関連して非常に興味深い。

The lime body is a must and the function is unknown. The purpose of this study is to explain the functions of biochemistry and molecular biology. This year and the previous year, there was a large amount of lime particles that were special, and there was a lot of them. Analytical results of ノAcid coordination をもとにデータベースなどを Use いて伝子のクローニングをtest みた.明らかにしたタンパク性のうち特に発existingquantityの多い16kDa, 10kDa, 8kDa のタンパク性はいずれも Same as the remaining 缝子が単cystworm のみでreport されていた. Report the alignment of PCR and partial alignment of cDNA. In the future, we are looking forward to analyzing the functions and manufacturing antibodies of high-quality and high-quality antibodies. The purpose of this year's analysis of the quality and function of the current year is: Sulfuric acid is used to extract the properties of sulfuric acid.そのRESULTS Tween20やサルコシルによってもタンパクqualityがdrawoutされdrawoutefficiencyもTCAとであった. From now on, I will draw out the quality of the material and use it to explain the functions of my physiology. A report on the influence of さらに, lime body and the host's immune system and the possibility of されていることから, this year's はまず, lime body extracted タンパク性のantigenicity について検した. When infected with Masato serum, the series can be extracted using the above-mentioned method.いてウェスタンブロッティングによりanalyticsした.その, the existence of lime body, 50kDa のタンパク性が, 1 month after infection, からバンドとして検出された. Indication of the possibility of the existence of これは and lime bodies and the quality and antigenicity of これは and lime bodies The physiological function of the lime body and the physiological functions of the lime body are related to each other and are very interesting.