ヒト腫瘍におけるEph/Ephrinファミリーおよびその周辺蛋白の発現機能解析

Eph/Ephrin家族及相关蛋白在人类肿瘤中的表达及功能分析

• 批准号: 17790260
• 负责人: 森 弘樹
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790260/
• 关键词: Eph; Ephrin; 大腸癌; DNA methylation

Eph familyの中で、大腸癌症例において、腫瘍部での発現が低下していることが示されているEphA7の解析を行っている。細胞生物学的な解析にあたり、pQCXIN vector (retro virus vector)を用いた発現vectorを制作した。制作されたものはEphA7のC端にEGFPのついたEphA7-EGFP、 Ephrin binding domainのないEphA7(-Elbd)-EGFP、 Extracellular domainのないEphA7(-etracellular)-EGFP、 kinase domain以下のないEphA7(-KD)-EGFP、 SAm domain以下のないEphA7(-SAM)-EGFPとcontrolのEGFPである。上述のものを、大腸癌細胞株HCT116を用いて解析を行った。HCT116はEphA7がhypermethylationによって発現低下していることが示されている。さらに今回、EphrinA1-5がmRNAレベルで発現していることが確認された。各constructがHCT116でどのように局在するか観察した。その結果、全長、-KD、-SAMで細胞膜に局在した。これは一般的にいわれていることと矛盾しない。しかし、-Elbdや-extracellularで細胞内にびまん性に局在した。これはEphA7のN端側に膜移行signalがあるといわれていることに矛盾しない。細胞挙動については、細胞増殖やsoft agarにおいてEphA7とcontrol間で差が認められ、EphA7がある方が細胞増殖は抑制され、colony形成も抑制された。今後それぞれのdomainを削ったものにおける細胞挙動の差を観察し、expression arrayや免疫共沈法等でEphA7発現低下における癌進展のsignal経路を同定する。

Eph family の で, colon cancer cases に お い て, swollen sores で の 発 now low が し て い る こ と が shown さ れ て い る EphA7 の parsing line を っ て い る. The な analysis of cell biology にあた, pQCXIN vector (retro virus vector)を, and the production of <s:1> た using た to generate vectorを. To produce された <s:1> <s:1> <s:1> EphA7 <s:1> c-end にEGFP <s:1> <s:1> た epha7-EGFP, Ephrin binding domain <s:1> な <s:1> EphA7(-Elbd)-EGFP, Extracellular domain な な な EphA7(-etracellular)-EGFP, な な EphA7(-KD)-EGFP below kinase domain, <s:1> な EphA7(-SAM)-EGFP below SAm domain とcontrol <s:1> EGFPである. The above <s:1> <s:1> を を and the colorectal cancer cell line HCT116を can be analyzed by て て for the を line った. HCT116 は EphA7 が hypermethylation に よ っ て 発 now low し て い る こ と が shown さ れ て い る. Youdaoplaceholder0 this time, EphrinA1-5がmRNAレベ で で appeared, <s:1> て る る とが とが confirmed された. Each constructがHCT116で <s:1> ように ように office examines た た at する 観 観. Youdaoplaceholder0 そ results, full-length, -KD, -SAMで cell membranes に are localized in た た. The general に われて われて る る とと とと とと contradiction る な な. The にびまん に of <s:1>, -elbd や-extracellularで is localized in <s:1> た. <s:1> れ とに EphA7 <s:1> n-terminal side に membrane transition signalがあると われて る ると に とに contradiction な な な. Cells 挙 に つ い て は や, cell rights colonization soft AGAR に お い て EphA7 と で difference between control が recognize め ら れ, EphA7 が あ る party が は inhibit cell raised colonization さ れ, colony forming も suppression さ れ た. Future そ れ ぞ れ の domain を cut っ た も の に お け る cells 挙 の poor を 観 し, expression array や immune were shen method で EphA7 発 now low に お け る cancer progress の signal を 経 road with fixed す る.