中枢神経障害をおこす手足口病ウイルスの感染機構に関する研究

手足口病病毒引起中枢神经系统紊乱的感染机制研究

• 批准号: 17790314
• 负责人: 西村 順裕
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790314/
• 关键词: 感染症; ウイルス; 生体分子; 蛋白質; レセプター

本研究は、enterovirus71型(EV71)が細胞に感染する際に認識する、細胞膜上レセプターの同定を目的とする。本研究に用いるレセプター同定法(パンニングを用いた発現クローニング法)には、EV71粒子が必要となる。しかしポリオウイルス等に比べ、EV71は増殖効率が悪く、大量にウイルス粒子を得るのは困難であった。本年度はパンニング法を改良するため、バキュロウイルスを用いたEV71ウイルス様粒子(VLP)大量発現系の構築を行った。(1)EV71キャプシド蛋白質(VP4,VP2,VP3,VP1)を発現する組換えバキュロウイルスを構築した。(2)EV71非構造蛋白質3CDを発現する組換えバキュロウイルスを構築した。(3)昆虫由来Tn5細胞に(1)(2)の二種類の組換えバキュロウイルスを共感染させ、VLPの発現を解析した。同時に感染させる場合に比べ、遅れて3CD発現組換えバキュロウイルスを感染させた場合の方が、VLP発現量が高くなることを明らかにした。(4)EV71キャプシド蛋白質、非構造蛋白質3CDを異なるプロモーターで発現できる組換えバキュロウイルスを作製した。これにより、(3)の方法に比べて簡易で、しかも大量のVLPを合成できる系を確立できた。上記のように作製したVLP、および前年度に作製したレトロウイルスライブラリーの組み合わせにより、パンニングによる発現クローニング法を改良できた。この方法により、EV71レセプター候補分子が分離されつつある。

The purpose of this study was to understand the role of enterovirus71 (EV71) in cell infection and to determine the identity of EV71 on cell membranes. In this study, EV71 particles were identified by the same method. The EV71 has a high growth rate and a large number of particles. This year, we will improve the quality of our products and build a mass production system for EV71 particles. (1) EV71 protein (VP4, VP2, VP3, VP1) development and transformation of the protein structure. (2) EV71 non-structural protein 3CD development and transformation (3)Analysis of co-infection and VLP occurrence of two species of insects derived from Tn5 cells (1) and (2) At the same time, the infection rate is higher than that of the 3CD detection group, and the VLP detection rate is higher. (4) EV71 protein and non-structural protein 3CD are different from each other. The method of (3) is simpler than that of (4), and a large number of VLP are synthesized. The above mentioned system is VLP, and the previous year's system is VLP, and the system is VLP, and the system is VLP. This method, EV71, is used to isolate candidate molecules.

项目成果

Human VAP-B is involved in HCV replication through interaction with NS5A and NS5B.

人 VAP-B 通过与 NS5A 和 NS5B 相互作用参与 HCV 复制。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Virology 79(21)
• 作者: Shin-ichi Tsukumo;Nishimura Y. et al.;Okamoto T. et al.;Omatsu T. et al.;Yang C.et al.;Hamamoto I. et al.
• 通讯作者: Hamamoto I. et al.

Molecular cloning and sequencing of the cDNA encoding the bat CD4

• DOI: 10.1016/j.vetimm.2005.12.002
• 发表时间: 2006-06-15
• 期刊: VETERINARY IMMUNOLOGY AND IMMUNOPATHOLOGY
• 影响因子: 1.8
• 作者: Omatsu, Tsutomu;Nishimura, Yorihiro;Yoshikawa, Yasuhiro
• 通讯作者: Yoshikawa, Yasuhiro

Molecular cloning of a cDNA encoding the feline CD62L.

编码猫 CD62L 的 cDNA 的分子克隆。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Veterinary Medical Science 69
• 作者: Nishimura;Y.;Shimojima;M.;Tohya;Y.;Miyazawa;T.
• 通讯作者: T.