細胞内コレステロール生合成系の制御と動脈硬化に関する発生工学的研究

细胞内胆固醇生物合成系统调控与动脉硬化的发育工程研究

• 批准号: 17790601
• 负责人: 大橋 健
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790601/
• 关键词: コレステロール; 動脈硬化; HMG-CoA還元酵素

本研究では、HMG-CoA還元酵素阻害薬(スタチン)の多面的効果の背景にある動脈硬化の分子病態を解明するため、コンディショナル遺伝子ターゲティングの手法を用いて肝臓、膵β細胞、血管内皮、単球/マクロファージにおいてそれぞれ臓器特異的にHMG-CoA還元酵素を欠損する遺伝子改変マウスを作成・解析することを目指した。昨年度は、ES細胞を用いたジーン・ターゲティングの手法によりHMG-CoA還元酵素遺伝子の標的部位にloxP配列を挿入したマウス(floxed animal)を作成。Floxed animalには明らかな異常はなく、妊孕能にも異常を認めなかった。Cre発現アデノウイルスの投与によりCre-loxPシステムがデザインどおり機能することを確認した。Cre発現アデノウイルスの投与実験では、主に肝細胞におけるHMG-CoA還元酵素の失活を呈するが、その結果高度の肝障害をきたした。今年度は、このマウスを、臓器特異的プロモーター下にCreレコンビナーゼを発現するCreトランスジェニックマウス(Cre-Tg)と交配させ、特定臓器でのみHMG-CoA還元酵素を欠損するマウスの作成・解析を進めた。Cre-Tgとしてはまず、アルブミンおよびラットインスリン各遺伝子のプロモーターを、それぞれ肝細胞、膵β細胞特異的プロモーターとして使用したマウスを用いた。肝特異的欠損マウスでは、重度の肝障害を呈し、致死的であった。膵β細胞特異的欠損マウスにおいては、耐糖能異常の有無を現在検討中である。今後、血管内皮特異的欠損マウスおよびマクロファージ特異的欠損マウスの作成を進める。

In this study, the multi-faceted "fruit" background, "animal sclerosis" molecular pathology, "HMG-CoA" and "meta-enzyme blockage" were used to understand the molecular pathology of animal sclerosis. The HMG-CoA enzyme of the special device was analyzed in terms of the content of the enzyme in the device. Last year, the ES cell was made by using the part of the HMG-CoA enzyme that was inserted into the floxed animal (floxed animal). Floxed animal can tell you that you have a lot of pain and that you can get pregnant very often. The Cre system is responsible for the investment and confirmation of the Cre-loxP investment. The results of Cre showed that the inactivation of HMG-CoA enzymes in the host liver cells was abnormal, and the results showed that there was a high degree of liver damage. In the current year, in the current year, we have special information about Cre. This year, we have found that there is a significant difference in the level of mating (Cre-Tg), and that of the HMG-CoA enzyme in the specific device. Cre-Tg