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胎児低形成肺の病態におけるFGFファミリーの役割とその治療応用に関する基礎的研究

FGF家族在胎儿肺发育不良病理学中的作用基础研究及其治疗应用

基本信息

批准号：
17790747
负责人：
北東功
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790747/
关键词：
成長因子低形成肺細胞・組織発生・分化シグナル伝達

项目摘要

緒言:低形成肺は治療が困難で、死亡率の高い新生児の疾患である。ニトロフェンを妊娠マウスに投与することによって胎児肺が低形成となることはよく知られており、低形成肺のモデル動物として頻用されている。実験的低形成肺の成因として様々な成長因子の関与が考えられている。今回、ニトロフェンを、妊娠9日目のマウスに投与し、妊娠18日または妊娠13日に胎児肺を摘出しFGFの低形成肺における役割につき、以下の検討を行った。正常コントロールとして、オリーブオイルを妊娠9日目にマウスに投与した胎児肺を使用した。1)低形成肺における、FGFRの発現方法:妊娠18日目に胎児肺を摘出し、肺蛋白を抽出した。蛋白定量を行った後、等量のタンパク量を電気泳動し、Western Blotting、酵素抗体反応を用いてFGFR-1,2,3の発現を検討した。低形成肺4検体、コントロール4検体で比較した。有意差検定は、Student-t検定を用いた。結果:FGFR-1,-3の発現は低形成肺において有意に低下していた。FGFR-2の発現については有意差が認められなかった。2)低形成肺におけるFGF-9の作用方法:妊娠13日目の胎児肺を顕微鏡下に摘出、24well plateにDMEM/F12培地1mlを滴下しTrack Etch Membraneを浮遊させ、その上に肺を静置し培養を行った。FGF-9を0ng/ml、20ng/ml、50ng/mlの濃度で培地に添加し、実体顕微鏡を用いて、24,48,72時間毎に器官の成長を観察した。結果:FGF-9による気管分岐数の増加、肺胞領域の変化は認められなかった。コントロール群においても変化は認めなかった。考案低形成肺におけるFGFR-1,-3の発現は低下していた。免疫染色では低形成肺でFGFR-2の発現が明らかに低下しており、サンプルを増やすことにより、有意差が得られる可能性が高い。FGF-9による胎児肺の成長効果は今回の検討では認められなかった。コントロール群でも変化が認められなかった事から、今後、FGF-9の濃度を増量し、さらに検討する必要があると考えられた。

Words: low formation of lung disease, treatment, difficulty, high mortality, high birth rate, disease and disease. The pregnancy was induced and the low formation of the fetal lungs was not known. The cause of the low formation of the lungs is different from that of the growth factors. This time, pregnant women, pregnant women on the 9th day of pregnancy, pregnant women on the 18th day of pregnancy, 13th day of pregnancy, fetal lungs on the 18th day of pregnancy and 13th day of pregnancy, the lower formation of the lung, the lower lung formation, the lower lung mass, and the following pregnancy. Normal pregnancy, lung, lung and lung. The main results were as follows: 1) low formation of lung cancer, FGFR detection method: fetal lung extraction and lung protein extraction on the 18th day of pregnancy. After the protein quantification was carried out, the enzyme FGFR-1,2,3 assay was used to detect the activity of protein, Western Blotting, enzyme antibody and so on. The low formation of the lung has a 4-inch body, and the lung has a 4-body ratio. Intentional decision, Student-t determination of the use of equipment. Results: the low formation of lung cancer was found in FGFR-1,-3 patients. FGFR-2 said that he intended to make a mistake because he did not want to. 2) the method of action of low-formation lung FGF-9: the lung of 13-day pregnancy was extracted, the 1ml of 24well plate DMEM/F12 was dripped with Track Etch Membrane, and the lung was placed on the upper side of the lung. FGF-9 0ng/ml, 20ng/ml, 50ng/ml were added to the ground, the body was used for microculture, and the organs were grown at 24, 48 and 72 hours to observe the growth of organs. Results: there was a significant increase in the number of tube bifurcations in FGF-9 patients, and there was significant difference in lung cell domain. I don't know what to do. I don't know what to do. Low examination results in lung disease, lung disease, FGFR-1,-3, lung disease, lung cancer, lung cancer, lung cancer Immunostaining showed that the formation of lung FGFR-2 was low, the possibility of low lung formation was high, and the possibility of intentional poor lung formation was high. The lungs of the FGF-9 baby will grow up. This time, you will be suffering from a severe lung injury. In the future, FGF-9 needs to know that it is necessary to take part in the test.