臍帯間葉系幹細胞を用いた先天性横隔膜ヘルニアの低形成肺に対する新規治療の開発

利用脐带间充质干细胞开发治疗先天性膈疝引起的肺发育不良的新疗法

• 批准号: 22K08726
• 负责人: 新開 統子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08726/
• 关键词: 臍帯間葉系幹細胞; 肺低形成; 先天性横隔膜ヘルニア; 肺高血圧; 再生医療; 器官培養

R4年度は研究責任者の異動があり、実際に研究を開始できたのはR5年の4月からとなった。そのため、実験の開始が想定より大幅に遅れている。ただし、異動先の研究室は細胞培養実験の設備が整っており、培養細胞を用いた実験を安定的に行う環境が整っている。今年度の研究成果の具体的内容：本研究で用いる臍帯間葉系幹細胞を継代培養することから開始した。臍帯間葉系幹細胞はPromoCell社から購入し、専用の無血清培地を用いた。しかしながら、臍帯間葉系幹細胞は接着性が弱炒め、フィブロネクチンコーティングの培養器を必要とした。今回フィブロネクチンコーティングフラスコを用いなかったために、臍帯間葉系幹細胞を増やして継代していくことができなかった。浮遊した幹細胞は約2週間で直径1mm以上のspherocyteのように増大した。当初、培養液の交換は週に2回で行なったが、最後の週は週1回にとどめたが、そのためか幹細胞の増大が顕著となった。今回使用している幹細胞の培養では、週1回の培地替えが妥当である可能性が考えられた。重要性：細胞はそれぞれ特徴があり、培養環境は一定でない。細胞の特徴をよく理解することが重要である。現在、フィブロネクチンコーティングの培養器を購入して、再度臍帯間葉系幹細胞を継代培養を行う予定である。今後、臍帯間葉系幹細胞の継代においては、培地交換の頻度を週1回程度にとどめることが、細胞の成長に適しているものと考えられた。

在R4中，研究负责人被转移了，研究实际上并未在R5的4月开始。因此，实验的开始显着延迟了。但是，我们被转移的实验室配备了细胞培养实验，以及一个可以使用培养细胞进行稳定实验的环境。今年研究结果的特定内容：该程序首先培养本研究中使用的间充质干细胞。脐带间充质干细胞购自Promocell，并使用了专用的无血清培养基。然而，脐带间充质干细胞具有弱粘附性，需要纤连蛋白涂层的孵化器。因为这次我们没有使用纤连蛋白包被的烧瓶，所以我们无法增加并通过脐带间充质干细胞。悬浮的干细胞在大约2周内增加，例如直径为1毫米或更多的球形细胞。最初，培养基每周更改两次，但在上周只有一次，但也许是因为这样，干细胞的增加变得更加明显。据认为，这次使用干细胞的培养物将适合每周改变培养基。重要性：每个细胞都有其自身的特征，文化环境不是恒定的。很好地了解细胞的特征很重要。目前，我们计划再次购买纤连蛋白涂层的孵化器和亚培养物，脐带间充质干细胞。将来，人们认为，脐带间充质干细胞通过介质交换的频率适合细胞生长。