オピオイド耐性の克服:二量体化オピオイド受容体における解析

克服阿片类药物耐受：二聚阿片类受体分析

• 批准号: 17791039
• 负责人: 北條 美能留
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791039/
• 关键词: オピオイド; 二量体; 耐性

本研究では二量体化オピオイド受容体の脱感作に与える影響を一量体受容体と比較検討し、各種オピオイド製剤の二量体化オピオイド受容体に対する反応性の違いを検討する。このことによって各種オピオイドの効果的な使用方法、オピオイド耐性形成における二量体受容体の役割を分子生物学的に明らかにした。(方法)1、μオピオイド受容体、δオピオイド受容体の細胞内局在の検討(共焦点レーザーによる受容体細胞内局在の検討)2、各種オピオイド製剤を使用し、受容体のinternalizationを可視化3、二量体化の証明。(共焦点レーザーを用いたFRET解析).4、β-arrestin2、μオピオイド受容体の可視化と複合体形成の証明(FRET解析)5、β-arrestin2なしでの受容体internalizationの評価(結果)1、モルヒネ刺激ではμオピオイド受容体はinternalizationを引き起こさなかった。一方、フェンタニル刺激ではinternalizationを引き起こした。2、μ-δヘテロ二量体化受容体では、モルヒネもフェンタニルと同様、受容体のinternalizationを引き起こした。3、μ-δヘテロ二量体受容体発現細胞においてモルヒネ、フェンタニルでinternalizationされた受容体は二量体であった。4、β-arrestin2、μオピオイド受容体は複合体を形成しinternalizationを引き起こした。5、β-arrestin2の存在なしでは受容体internalizationは引き起こされなかった。さらにGRK2、GRK4がμオピオイド受容体の脱感作に与える影響を検討した。(方法)クローン化μ受容体のC末端、ならびにGRK2,4のC末端にVenus,Ceruleanをそれぞれ連結したものを作製する。さらにμ受容体のN末にT7-Tag,GRK2,4のN末にFLAG-tagを導入しBHK細胞に発現させμ受容体の脱感作を検討した。(結果)GRK2はμ受容体の脱感作を引き起こし、GRK4は起こさなかった。現在日本において臨床で用いられているオピオイド製剤はモルヒネ、フェンタニル、オキシコドンの3剤である。今回のモルヒネ、フェンタニルでの検討に加えオキシコドンについても、オピオイド耐性と二量体化受容体との関連についてさらに検討していく予定である。

This study is to investigate the effects of two quantitative methods on the desensitization behavior of the receptor, a comparative study of the receptor, and two quantitative methods of various control agents on the response of the receptor. The application of these methods, the development of tolerance, the isolation of two-dimensional receptors, and the development of molecular biology (Methods)1. Study of intracellular localization of μ-and δ-receptor (confocal)2. Use of various control agents 3. Visualization of internalization of receptor 2. Verification of quantification. (FRET analysis). 4. β-arrestin2, μ-arrestin2, μ-arres On the one hand, the stimulation ofルhas led to the rise of internationalization. 2. μ-δ-T-T 3. μ-δ-T-T 4. β-arrestin2, μ-arrestin2, arrestin 2, μ-arrestin 2, μ-arrestin 2, arrestin 2, 5. β-arrestin2 exists and is not accepted by internalization. GRK2 and GRK4 are now under investigation for the effects of de-sensitization on receptors. (Method) The C-terminal, C-terminal and C-terminal of GRK2,4 are linked to Venus,Cerulean. The N-terminal FLAG-tag of GRK2,4 and T7-Tag of μ receptor were introduced into BHK cells to detect the desensitization of μ receptor. (Results) GRK2 and GRK4 were found to be sensitive to the receptor. In Japan, there are three types of drugs used in clinical practice: anti-cancer, anti-cancer, anti-cancer and anti-cancer. This time around, we are looking for a way to increase the number of users, and to increase the number of users.

项目成果

Couping of GABA_B receptors of the GABA_<B2> subunit to G proteins evidence from Xenopus oocytes and baby hamster kidney cell expression system.

GABA_<B2> 亚基的 GABA_B 受体与 G 蛋白的偶联来自非洲爪蟾卵母细胞和幼仓鼠肾细胞表达系统的证据。

• 发表时间: 2006
• 期刊: American Journal of Physiology - Cell Physiology 290
• 作者: Kanaide M;Hojo M;et al.
• 通讯作者: et al.

Molecular mechanism involved in the developing tolerance to baclofen : Desensitization of GABAB receptor-mediated signaling through interaction with GRK4.

巴氯芬耐受性形成的分子机制：通过与 GRK4 相互作用使 GABAB 受体介导的信号脱敏。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Anesthesiology 103
• 作者: Kanaide M;Hojo M;et al.
• 通讯作者: et al.

GABA_<B2> receptor subunit in heterodimerized GABA_B receptors selectively transduces signal via the GABA_<B2> receptors associated G proteins.

异二聚化GABA_B受体中的GABA_<B2>受体亚基通过GABA_<B2>受体相关G蛋白选择性地转导信号。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences 100(Sup.I)
• 作者: Uezono Y;Hojo M;et al.
• 通讯作者: et al.

Desensitization of the GABA_B receptors by GRK4 and GRK5.

GRK4 和 GRK5 使 GABA_B 受体脱敏。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences 100(Sup.I)
• 作者: Yoshida Y;Hojo M;et al.
• 通讯作者: et al.

Ketamine inhibits desensitization of GABA_B receptor-mediated signaling through interaction with GRK4.

氯胺酮通过与 GRK4 相互作用抑制 GABA_B 受体介导的信号传导脱敏。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences 100(Sup.I)
• 作者: Kanaide M;Hojo M;et al.
• 通讯作者: et al.