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免疫と鎮痛に関する研究-肥満細胞が果たす魅力的な役割-

免疫与镇痛研究 - 肥大细胞的迷人作用 -

基本信息

批准号：
17791435
负责人：
城戸幹太
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度は培養肥満細胞を用いて実験を行い、肥満細胞にはβ-endorphinがpre-storeされており、種々の刺激により放出、再貯蔵されることが確認できた(RT-PCR、ELISA)。本年度はさらにこの機序の詳細とvivoにおける動態を検討した。1.肥満細胞に発現するreceptorの確認RT-PCRにてμopioid receptorおよびSubstance P receptorの発現を調べたところ、いずれのmRNAの存在も確認できた。タンパク発現の証明までには至らなかったが、このことは非常に重要な作用機序の一端を示していると思われる。すなわち、肥満細胞はβ-endorphinやSubstance Pを放出するだけでなく、自身にもそれらのreceptorを発現させ、何らかの細胞内伝達シグナルを形成している可能性がある。2.マウスアナフィラキシーショックモデルにおける各臓器のβ-endorphinの発現の検討1(RT-PCR)最も肥満細胞の関与が知られている病態であるIgEアナフィラキシーショッグモデルを作製し、各臓器(皮膚、小腸、脾臓、肺、血液、下垂体)のproopiomelanocortin (POMC)の発現動態を検討した。ほぼ全てで陽性となったが、これは肥満細胞由来のPOMCのみならず、様々な細胞からPOMCが発現することが考えられたため、細胞を特定するには至らなかった。3.同上2(免疫組織化学染色)各臓器のパラフィン切片を作製し、抗β-endorphin抗体にて局在を調べた。何種類かの抗体を試したが精度の良いものがなく、皮膚においてβエンドルフィン陽性細胞が散見されたが、断定するには至らなかった。4.アナフィラキシーショックモデルの体温変動オピオイド拮抗薬のナルトレクソンを投与したところ病態が悪化した。以上これからも研究を続けていく所存である。

In the past year, the culture of fertile cells was carried out in the middle of the process, and the production of β-endorphin in the fertile cells was confirmed by RT-PCR and ELISA. This year's event is scheduled for discussion in detail. 1. RT-PCR to confirm the presence of uopioid receptor and Substance P receptor The proof of the discovery of the phenomenon is that it is very important to show one end of the action sequence The possibility of β-endorphin and Substance P release from cells in vitro and in vivo is discussed. 2. The development of β-endorphin in various organs (skin, small intestine, spleen, lung, blood, pituitary) was studied by RT-PCR. All positive and negative cell origin POMC. 3. As mentioned above in 2(Immunohistochemical staining), paraffin sections from each organ were prepared and the presence of anti-β-endorphin antibodies was adjusted. What kind of antibody is tested? The accuracy is good. The positive cells in the skin are scattered and determined. 4. The body temperature of the patient is changed from normal to abnormal. The above is a study of the existence of the Chinese language.