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雄性生殖細胞の簡便凍結保存法と顕微授精技術を利用した産子獲得技術の開発

利用雄性生殖细胞的简易冷冻保存方法和显微授精技术开发后代获得技术

基本信息

批准号：
17700381
负责人：
越後貫成美
金额：
$ 1.86万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17700381/
关键词：
実験動物発生工学凍結保存雄性生殖細胞顕微授精マウス

项目摘要

誰にでもどのような場面でも即対応できる簡便な雄性配偶子の凍結保存技術の開発を目的として、雄マウスの精巣上体、精巣を組織のまま凍結チューブに入れて凍害剤や液体窒素等の特殊な道具を用いずに-80℃ディープフリーザーで凍結保存を行った。融解は凍結チューブを室温で水に浸けることにより行った。融解後、組織を細切して細胞の採取を行った。精巣上体精子、精巣精子、円形精子細胞をそれぞれマウス未受精卵に顕微注入して受精能について検討したところ、全ての細胞種より産仔が得られた。液体窒素なしで保存可能であることを応用して凍結サンプルのドライアイスによる輸送を試みた。イギリスから輸送後、日本において精巣上体精子、精巣精子、伸長精子細胞を用いた顕微授精-胚移植を行ったところ全ての細胞種より産仔が得られた。この結果よりドライアイスによる輸送後も受精能を保持していることが明らかになった。また、1年間、-80℃にて凍結保存した精巣および精巣上体由来の精子、伸長精子細胞、円形精子細胞からも産仔が得られ本法は長期保存も可能であることが明らかになった。さらに15年間、-20℃で凍結保存されていたマウス個体を融解して回収した精巣精子を用いて顕微授精を行ったところ、2系統から合計27匹の産仔が得られた。これらの産仔は形態学的に正常で成熟後に繁殖能も正常であることが確認された。これらの結果により、本凍結方法は簡便かつ安全に雄性配偶子を凍結保存ができ、ドライアイスによる輸送が可能な方法であることが明らかになった。つまり凍結技術や液体窒素等がない場合でも凍結保存が可能で、顕微授精技術のある研究室に輸送することで産仔獲得の可能性が考えられる有用な技術といえる。さらには凍結個体由来の精子でも産仔が得られたことより、永久凍土に眠る絶滅動物の精子を回収して近縁種の卵子に顕微授精することで産仔が得られる可能性も考えられる。

In the first place, the male gamete, male mating, male mating, male, female, male, male Dissolve the water at room temperature and immerse the water in the room temperature. After melting, the tissue tissue was cut and the cells were collected. Sperm, spermatozoa, spermatozoa, spermatozoa, Liquid asphyxiate may be used to save the food. Please send it to the test station. After delivery, Japanese sperm sperm, sperm and elongated sperm cells were successfully fertilized by micro-insemination-embryo transfer in Japan. The results showed that it was possible to be fertilized after delivery. This method can be used for long-term preservation of spermatozoa. It is possible to use this method for long-term preservation of spermatozoa, elongated spermatozoa, elongated spermatozoa and spermatozoa at-80 ℃. During the period of 15 years, the temperature of-20 ℃ was used to save the sperm of the two systems. A total of 27 embryos were collected in the 2-system system. The "normal" reproduction after maturity is known as "normal" and "normal". The results show that the male mating is safe, and the male mating is safe. In the field of technology, liquid asphyxiation, and so on, the possibility of preservation and the possibility of microinsemination technology were studied in the laboratory of micro-fertilization technology. The reason for this is that the sperm baby is not allowed to get the baby, and the sperm is used to test the possibility of microinsemination of nearly all kinds of eggs.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Spermatozoa and spermatids retrieved from frozen reproductive organs or frozen whole bodies of male mice can produce normal offspring

DOI：
10.1073/pnas.0605755103
发表时间：
2006-08-29
期刊：
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
影响因子：
11.1
作者：
Ogonuki, Narumi;Mochida, Keiji;Ogura, Atsuo
通讯作者：
Ogura, Atsuo

顕微授精法

显微授精法