Aux/IAAとARFタンパクが介するオーキシン情報伝達系の分子機構研究

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Aux/IAA遺伝子族の優性突然変異msg2, axr2を利用し、変異型cDNAをそれぞれのプロモーターを用いて野生型で発現させるた結果、変異体の表現型を再現することができた。さらに、同様の変異体、slrの変異型cDNAを含めてプロモーター・スワッピングを行った結果、表現型は必ずしもプロモーター依存的には規定されず、優性変異を持つAux/IAA遺伝子の間で、タンパクの性質に違いがある事が示された。これらの結果をまとめてPlant Physiol.誌に投稿し、受理された(in press)。AUX/IAAは酵母two-hybrid系で、不特定のARFと同程度に相互作用することが複数例確認されているが、これらの結果が植物の中での実際の現象を反映しているか、今も慎重な議論が続いている。そこで、蛍光相互相関分光法(Fluorescence Cross Correlation Spectroscopy, FCCS)を用いてAUX/IAAとARFタンパク間相互作用を再評価した。Hela細胞内でGFPもしくはmRFPとの融合タンパクを発現し、測定した結果、IAA19はARF5やARF7のC末端と予想されるより極めて強く相互作用していることが分かった。これは、分子の動きを直接観察するFCCSに較べて、酵母two-hybrid系では、IAA19による転写因子の抑制効果の影響で、分子間相互作用を実際より低く見積もっていたことを示す。また、この結果から、植物内でのAUX/IAAとARFタンパク間相互作用の観察も可能であると予想される。これらの結果をPlant Cell Physiol.誌にて報告した。