オーキシン流入担体AUX/LAXの機能構造解析によるオーキシン輸送機構の解明

通过生长素流入载体 AUX/LAX 的功能结构分析阐明生长素转运机制

• 批准号: 22KJ0564
• 负责人: 萩野 達也
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ0564/
• 关键词: 構造生物学; 植物; オーキシン; 膜輸送体

AUX/LAXシンポーターは植物において生育に重要な植物ホルモンであるオーキシンの細胞内への流入に携わる膜輸送体である。オーキシンは生体内で生合成され、極性輸送によって特定の器官ごとに成長促進や屈性などの生理作用を引き起こすだけでなく、化学合成されたものが農薬として利用されている。本研究ではAUX/LAXシンポーターのアポ状態及び輸送基質である天然のオーキシンや農薬との複合体における立体構造を決定することで、植物のオーキシン輸送における輸送体の構造変化や基質認識機構といった詳細な分子基盤の解明を目的としている。これまでの実験において高純度での精製に成功したシロイヌナズナ由来AUX1およびダイズ由来LAX9について、クライオ電子顕微鏡を用いた単粒子解析による構造決定を目指して、試料調製条件やグリッド作製条件についての検討を行った。その結果、ダイズ由来LAX9について十分な粒子像の観測できるクライオ電子顕微鏡像の取得に成功した。この撮影データを用いて単粒子解析を試みたところ、十分な量の粒子像が得られていたものの粒子の二次元平均化像の収束が確認できず、三次元密度マップへの再構成が不可能であった。解析におけるパラメータの検討を行ったが、最終的にダイズ由来LAX9の三次元密度マップを得ることはできなかった。比較的分子量の小さな膜タンパク質の構造解析において、膜タンパク質を人工的な脂質二重層に再構成するという脂質ナノディスク法を用いた研究例が近年多く報告されており、現在はシロイヌナズナ由来AUX1およびダイズ由来LAX9について脂質ナノディスクへの再構成に関する検討を行っている。

AUX/LAX cells are important for plant growth and growth. They are important for the transport of membrane carriers. In vivo, the growth of specific organs promotes the growth of flexion, and the physiological role of flexion plays an important role in the physiological function of maleic acid, chemical synthesis, and chemical synthesis. The purpose of this study is to determine the status of the AUX/LAX complex, the plant structure, the chemical transport system, the chemical structure, the molecular basis, the molecular basis. This is very important because of the reasons for the success of AUX1. The reason for this is the origin of LAX9. The computer micrometer is used for particle analysis to determine the target index, the material condition, the operating condition, and so on. The result of the experiment, the cause of the problem is that LAX9 is very sensitive to the particle image, and the micro-image of the electron microphone is successful. In this paper, we use the particle analysis method to analyze the particles, measure the particle image by 10%, average the particle image by two-dimensional average image, confirm the particle image, and then reconstruct the three-dimensional density image into an impossible particle. This is the most important reason for the analysis of the three-dimensional density of the LAX9 in the first place. The molecular weight of the membrane is smaller than that of the membrane, and the molecular weight of the membrane is lower than that of the membrane. The molecular weight of the membrane is smaller than that of the membrane, the molecular weight of the membrane is smaller than that of the membrane, the molecular weight of the membrane is smaller than the molecular weight of the membrane, the molecular weight of the membrane is smaller than that of the membrane, and the molecular weight of the membrane is smaller than the molecular weight of the membrane. The molecular weight of the membrane is smaller than the molecular weight of the membrane, the membrane is used to analyze the artificial fat, and then the artificial fat is made into an artificial fat, and then it is reorganized into a series of materials. In recent years, there have been many reports that there have been many reports in recent years, and now that there are many reports in recent years, there are many reports in recent years, and now there are many reports on the origin of AUX1.